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- 百奥莱博
- WE0286-JLF
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
71
- 英文名：
SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
2～8℃
- 规格：
200ml
特别提示：包括SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
英文名称：SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)
产品货号：WE0286
产品规格：200ml
本产品为配制SDS-PAGE浓缩胶缓冲液，可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶，方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。
操作步骤：
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，zuì佳胶浓度请参考附表1。
I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
注：加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触，是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可)， 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层，使凝胶表面保持平整。
5、静置30-60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，表面凝胶已聚合。
II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、加入10%guò硫酸铵和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
6、静置10~20分钟，等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与zuì佳分离范围
| SDS-PAGE 分离胶浓度 | zuì佳分离范围 |
| 6%胶 | 50-150 kD |
| 8%胶 | 30-90 kD |
| 10%胶 | 20-80 kD |
| 12%胶 | 12-60 kD |
| 15%胶 | 10-40 kD |
附表2. 配制SDS-PAGE分离胶
| 分离胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位：ml) | ||||
| 纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 分离胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | ||
| 6% | 5ml | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
| 10ml | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
| 15ml | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
| 20ml | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 | |
| 8% | 5ml | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
| 10ml | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
| 15ml | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
| 20ml | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 | |
| 10% | 5ml | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 12% | 5ml | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 15% | 5ml | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
附表3. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶
| 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位：ml) | ||||
| 纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 浓缩胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | |
| 2ml | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
| 4ml | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
| 6ml | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
| 8ml | 4.56 | 1.36 | 2 | 0.08 | 0.008 |
储存条件：2～8℃
我公司销售的SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)报价，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验样品。 跑胶：浓缩胶推荐用 80 伏电压，待样品进入分离胶后，可用 120-180 伏电压。 跑胶完成以后，需先将胶上无样品的多余部分切除，滤纸和海绵需要预先润湿。 分离的蛋白转移至膜载体上 选择合适的膜 转膜：以 NC 膜为例 提前十分钟到半小时用转膜 Buffer 润洗 NC 膜 按照以下的结构来安装转膜体系：负极-海绵-三层滤纸-胶-膜-三层滤纸-海绵-正极。 转膜，一般为 2 小时。 转完后将膜用1×丽春红染液染 5 min（于脱色摇床上摇）。然后用水冲洗掉没染上的染液就可看到膜上的蛋白。将膜
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量（垂直板型电泳）（图）
的，可以用SDS-凝胶电泳法测定其分子量。 SDS-PAGE有连续体系及不连续体系两种，这两种体系有各自的样品溶解液及缓冲液，但加样方式，电泳过程及固定、染色与脱色方法完全相同。三、器材与试剂： 1．器材： ①夹心式垂直板电泳槽，凝胶模（135×100×1.5mm）（北京六一仪器厂） ②直流稳压电源（电压300～600V，电流50～100mA） ③吸量管（1，5，10ml） ④烧杯（25，50，100ml） ⑤细长头的滴管
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民强，祝愿祖国人民幸福康泰，安居乐业。 经常碰到客户说货期长，在我们这里有现货，不存在货期长。经常有客户问品质有没有保证，在我们这里所有产品都经过严格的检测才可以出厂，并获得ISO9001质量管理体系认证。经常有客户说成本居高不下，在我们这里购买产品都是以成本最低的价格给你，所以这一点请您放下您壹佰二十条心。我也经常听到老板、报价人员、员工说忙、累，但努力了、付出了、敬业了、认真了，都没有达到理想的目标，在我们这里都会一一给你解决，有我们助您一臂之力，让您轻松舒心省心放心，您的事就是我的事
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