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- 百奥莱博
- SY0349-BVH
- 北京
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
109
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
10×2ml
特别提示：包括5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液
产品货号：SY0349
产品规格：10×2ml
本品用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer)，是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质－SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异，SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构，DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质的空间结构，消除了蛋白结构之间的差异。因此，电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。
注意事项
1) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2) 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。
3)5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液必须完全溶解后再使用。
操作方法
1. 在室温或不超过37℃的水浴中溶解5×SDS-PAGE上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每4 μl蛋白样品加入1 μl 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液的比例，混合蛋白样品和5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。
3.100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白。
4.冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
储存条件：-20℃，有效期一年。
我公司销售的5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液优惠促销，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心（3000 rpm，5 min）收集 Agarose 珠子，弃掉上清，用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。（小心吸取上清，避免触碰底部珠子） 收集沉淀，加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀，轻混均匀后煮沸 5 min，12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管，进行 Western 检测。
糖珠用 1 ml 裂解缓冲液洗 3～4 次；最后加入 15 μl 的 2 × SDS 上样缓冲液，沸水煮 5 分钟。 6. SDS-PAGE，Western blotting 或质谱仪分析。 三、通过免疫共沉淀确定结合蛋白 1. 用磷酸盐缓冲液洗 30 块 10 cm 培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到 1 ml 冰冷的 EBC 裂解缓冲液中。 2. 将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中，在微量离心机上 4 ℃ 以最大速度离心 15 min。 3. 收集上清（约 30 ml）并加入 30 μg 的适当
L 缓冲液I 溶解包涵体；室温放置lh ；加9×缓冲液Ⅱ，室温放置30 min ，用KOH 调pH 到10.7 ；用HCI 调至pH 8 .0 ，在室温放置至少30 min ; 1000g 离心，15 min ，室温；吸出上清液并保留，用100 μL 2×凝胶电泳加样缓冲液溶解沉淀；取10 μL 上清，加10 μL 2× 凝胶电泳加样缓冲液，与20 μL 重新溶解的沉淀进行SDS-PAGE 。四、注意事项（1）不同的大肠杆菌表达载体带有不同的启动子和诱导成分。实验者必须根据特定系统和用途决定
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