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12
- 英文名:
Recombinant Cytochrome P450 Reductase (CPR)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
10ug-5mg
英文名称:Recombinant Cytochrome P450 Reductase (CPR)
规格:10ug/50ug/200ug/1mg/5mg
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/µg(LAL法测定)
亚细胞定位:细胞膜
预测分子量:53.3kDa
实际分子量:53kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Gly77~Phe518 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
等电点:5.0
纯度:> 97%
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB
用法:Reconstitute in 20mM Tris, 150mM NaCl (pH8.0) to a concentration of 0.1-1.0 mg/mL. Do not vortex.
储存:2-8°C不超过一个月,-80°C不超过12个月。避免反复冻融。
稳定性:热稳定性以损失率显示。损失率是由加速降解试验决定,具体方法如下:在37°C孵育48小时,没有显著的降解或者沉淀产生。保质期内,在适当的条件下存储,损失率低于5%。
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文献和实验2)。 图2 硝基苯和偶氮苯的还原反应 肝微粒体中含有多种水解酶,如酯酶、酰胺酶、糖苷酶等,可分别催化酯类、酰胺类、糖苷类化合物的水解(见图3),以降低或消除其生物活性。 图3 乙酰水杨酸的水解反应 02 Ⅰ相代谢稳定性实验原理 肝药酶CYP即细胞色素P450氧化酶(CYP450),属于单加氧酶(momooxygenase),也称肝微粒体混合功能氧化酶,多位于内质网和线粒体内壁上,参与药物、致癌物、类固醇激素和脂肪酸等多种内、外源性物质代谢。肝药酶CYP氧化还原酶(POR)是所有肝
蛋白、含二硫键蛋白在体外成功复性。 包涵体形成的原因 重组蛋白在宿主系统中高水平表达时,无论是原核表达体系或真核表达体系甚至高等真核表达体系,都会形成包涵体[2]。主要因为在重组蛋白的表达过程中,缺乏某些蛋白质折叠过程中需要的酶和辅助因子,或环境不适,无法形成正确的次级键等原因形成的[3]。 1、 表达量过高,研究发现在低表达时很少形成包涵体,表达量越高越容易形成包涵体。原因可能是合成速度太快,以至于没有足够的时间进行折叠,二硫键不能正确配对,过多的蛋白间的非特异
产物,且代谢条件可控,代谢体系比较“干净”,代谢物易于分离、提取,有利于代谢途径研究及代谢产物结果的确定等,因而,体外代谢法具有突出的优越性。 由于肝脏是药物代谢的主要场所,体外代谢模型多以肝脏为基础。目前,研究体外代谢方法主要有:肝微粒体体外温孵法、重组P450酶体外温孵法、肝细胞体外温孵法、肝脏离体灌流法和肝切片法。其中,肝微粒体体外温孵法与其他体外代谢方法相比,酶制备简单,代谢过程快,重现性好,易大量操作,同时可用于药物代谢酶的抑制及体外清除等方面的研究,因而在实际工作中应用较为普遍。 1.2
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