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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
252
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
应用及保存人Ras-GTP酶激活蛋白1(Ras-GAP1)ELISA试剂盒小提示:
1、样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染。
2、冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。
3、标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。
4、血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。
5、要注意避免出现严重溶血。
人Ras-GTP酶激活蛋白1(Ras-GAP1)ELISA试剂盒标准曲线做不的原因分析:
A、刚加完显色剂时梯度明显,显色液可能是从高浓度向低浓度孔加的。
B、酶浓度太高,导致后显色结果都是高的。
C、包被:酶标系统不匹配或者酶标的非特异反应太强,或者酶标仪读数范围不够。
D、样本中有能够催化底物的物质,没洗下来。
建议:包被、酶标重新做梯度,先用较低的浓度把梯度摸索,然后再优化灵敏度,后调出所需的灵敏度、线性范围。
建议:有条件的话,可以把酶免的蛋白系统移植到板式化学发光上,加完底物三分钟读数。
建议:蛋白系统灵敏度够的话,显色十分钟就差不多了。
建议:酶是自己标的这种情况的,HRP比例不要太高。
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文献和实验上释放出来,取而代之的是GTP,从而将Ras激活,GEF的活性受生长因子及其受体的影响。另一个控制Ras蛋白活性的是GTP酶激活蛋白(GTPase activating protein, GAP),存在于正常细胞中,主要作用是激活Ras蛋白的GTP酶,将结合在Ras蛋白上的 GTP水解成GDP,成为失活型的 Ras蛋白—GDP。所以在正常情况下,Ras蛋白基本上都与 GDP结合在一起,定位在细胞质膜内表面上。
,但其酶活性较低。而GTP酶激活蛋白(GAP)则能促进GTP酶活性,使Ras蛋白水解GTP的速度提高1万倍,因此也是Ras通路的重要调节因素。另外,活化的Ras能直接结合并激活磷脂酰肌醇―3―激酶(P13K)的P110催化亚基,P13K活化后将二磷酸磷脂酰肌醇(PIP2)转化而生成第二信使三磷酸磷脂酰肌醇(PIP3),然后通过Rac/Cdc42等来调控细胞骨架运动,以及通过激活生存信号激酶PKB/AKT等靶蛋白来调控细胞生存。另外,鸟嘌呤解离刺激因子(RalGDS)是一种Ras相关蛋白Ral的GTP
现在各种癌组织中 ras 基因仅在第 12 或 61 密码上发生了点突变(病毒癌基因在第 59 位密码子上)导致氨基酸的取代。 带有GTP的Ras是有活性的,可以作用其靶分子,然后内在的GTPase 活性使 GTP 水解成 GDP ,而 GDP 的 Ras 成为失活状态,从而终止了其作用,有两种蛋白调节 Ras 蛋白从激活状态到失活状态相互间的转变。 (1) GTP 酶激活蛋白 GAP 刺激内在的 RasGTPase 使其水解被结合
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