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- 百奥莱博
- YT480-SCT
- 北京
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
208
- 英文名：
N-HA plasmid（with CMV promoter）
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1μg
特别提示：包括N端HA标签融合蛋白质粒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：N端HA标签融合蛋白质粒
英文名称：N-HA plasmid（with CMV promoter）
产品货号：YT480
产品规格：1μg
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达N端和HA tag(HA标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5"端含有一个可以编码HA标签的序列，因此可以表达出含有HA标签的融合蛋白，可以方便地使用抗HA的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| HA tag | 679-705 |
| multiple cloning site | 708-781 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 824-845 |
| SV40 polyA signal | 857-1240 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1378-1684 |
| bla promoter | 1709-1833 |
| SV40 promoter | 1853-2191 |
| neomycin/kanamycin resistance | ORF 2226-3017 |
| HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal | 3018-3476 |
| pUC origin | 3605-4272 |
本质粒的图谱如下：
使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件：-20℃。
我公司销售的N端HA标签融合蛋白质粒现货供应，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验的beads做coIP，隐患很大（可以轻易PD非常浓的非特异性蛋白）——因此，购买商品化a-HA beads时，请仔细阅读产品说明（避开12CA5系列）。 4. tag的位置。将tag构建到蛋白的N端还是C端，也是一个潜在的能够影响coIP结果的因素。比如，分泌蛋白的N端通常有分泌信号肽，如果将tag构建到N端，则外泌时会被信号肽酶连同信号肽一起切除；所以这时必须构建在C端。再如，多数蛋白的C端是疏水区，有的时候将tag构建在C端会影响蛋白原来的空间结构，如恰好C端同时是相互作用的结构域，某些时候还可能
前言: NusA融合蛋白表达系统于9年前（1999年）由Davis发明，并在2000年由Novagen首先进行商业化设计和开发，特别推荐用于以NusA作为N端标签时提高在大肠杆菌中难溶的重组表达蛋白的可溶性。NusA融合蛋白表达系统面市至今，已经通过一些高通量表达筛选的评估确认其在可溶性改善方面的有效性。关于NusA融合表达蛋白去除或不去除NusA标签，目的蛋白仍然具有活性的报道也有很多。正是由于NusA标签系统的这种特性，使其成为目前在大肠杆菌表达体系中使用最为广泛的三个融合标签
）时。这有助于研究低丰度蛋白质和优化难以表达的蛋白质项目。它也是一个很好的纯化标签。FLAG 序列还含有肠激酶切割位点，如果标签位于 N 端，切除后不留多余的残基。谷胱甘肽 S - 转移酶（GST）GST 是最早被使用的表位标签之一；它可以置于 N 或 C 端并可以蛋白质的可溶表达。用谷胱甘肽结合树脂进行纯化。绿色荧光蛋白（GFP）在表位标签中独一无二，GFP 是一种自发荧光的 27 kDa 标签，可通过荧光显微镜直接在活细胞中检测到。血凝素 A（HA）HA 来自流感血凝素蛋白的结合结构域，含有高
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