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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
313
- 英文名:
Calcium Phosphate Cell Transfection Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
200T
特别提示:包括磷酸钙法细胞转染试剂在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:磷酸钙法细胞转染试剂
英文名称:Calcium Phosphate Cell Transfection Kit
产品货号:SY0604
产品规格:200T
磷酸钙法转染DNA是基于形成磷酸钙-DNA沉淀的原理:磷酸钙可促使细胞膜和DNA的结合,之后通过细胞内吞的作用将外源DNA转入目的细胞。该方法曾被用于多种细胞系的转染。百奥莱博的磷酸钙法细胞转染试剂是在传统磷酸钙法的基础上经过特别优化,不仅在转染效率有了较大提高,且降低了细胞毒性,特别适合于293或293T细胞的转染,对其他大多数常见细胞如Hela、CHO也具有较好的转染效果,不仅适用于细胞的瞬时转染,且适用于稳转株的筛选。
产品组份:
CaCl2溶液————20ml
BBS溶液—————20ml
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)高纯度的质粒是获得高转染效率的必要条件,确保A260/A280>1.8,且电泳检测抽提到的质粒90%以上都是超螺旋。
3)在用磷酸钙法转染细胞时应使用浓度不高于5%的CO2,CO2的zuì佳浓度为3%左右。
4)BBS溶液的pH值直接关系到转染效率,尽量避免把BBS溶液长时间暴露在空气中,以免被空气中的CO2酸化。
5)转染时由于质粒、细胞不同,zuì佳的质粒用量需自行摸索。
储存条件:-20℃,有效期一年
我公司销售的磷酸钙法细胞转染试剂现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验一种极为高效且很方便的转染方法! 是华人科学家做出的结果,以下是全文 以下内容需要登录后才能完全查看,请您登录 马上登陆 | 企业会员注册
一、实验目的 学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。 二、实验原理 上图所示是脂质体介导转染的示意图,它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。 外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入
; 6) 加入10ml DMEM 培养液(含10%FBS),重新悬浮细胞,使细胞充分打散; 7) 进行细胞计数,(4 个大方格细胞数的均值×104 个为每ml 所含细胞数); 8) 根据细胞计数结果,将适当数量的细胞悬液转接入含有新鲜培养液的培养瓶 或皿中;(第二天做转染,A.Fugene6 法--细胞总量应达4-5×106 /10cm 培养 皿; B. 磷酸钙法: 细胞总量应达3×106 / 10cm 培养皿); 9) 置于37 ℃ 5%CO2 的培养箱中培养 (注意培养
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