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- 2025年11月04日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
93
- 英文名：
Proteinase K
- CAS号：
39450-01-6
- 保质期：
1年
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件：
2～8℃
中文名称：20mg/ml蛋白酶K溶液
英文名称：Proteinase K
CAS号：39450-01-6
级别：试剂级
20mg/ml蛋白酶K溶液
分子量：28.9 kDa
比活力:＞600U/ml，35℃
浓度：20mg/ml
性状(以下信息仅供参考)：液体，是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶， 来源于白色念球菌(. Tritirachium album. )，具有很高的比活性。EDTA等鳌合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活，反而增强和稳定酶活性，并在较广的PH范围内（PH4-12.5）均有活性。在组织或细胞核酸分离时，使核酸酶（RNA和DNA）以及反应中其他酶失活。
20mg/ml蛋白酶K溶液
用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)广谱蛋白酶，95C 加热10 分钟，则完全失活。可替代 DEPC 处理 RNA 抽提用的离心管和枪头，实现灭活 RNase A 的目的，也用于处理 RNase-Free的水。充分降解组织或细胞中蛋白质分子特别是核酸，以达到释放和萃取高质量核酸的辅助试剂。用于质粒或基因组DNA、RNA的分离以及蛋白多肽印迹实验。
保存：2～8℃
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文献和实验洗脱液，接着按照3.2b进行）2a.加入2ulRNaseA(0.5mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。DNA采用PCR纯化试剂盒中厂家说明进行纯化。样品冻存于-20°C.样品之所以加入RnaseA是因为高浓度RNA会在使用PCR纯化试剂盒时干扰DNA的纯化。而纯化柱子的饱和度是既定的。2b.加入5ul蛋白酶K(20mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。采用酚/氯仿抽提的DNA使用乙醇沉淀于10ul的糖原(5mg/ml).中。100ul水重悬浮。样品
一、柠檬酸钠法 1. 把玻片放在玻璃固定架上，再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠（pH6.0）的容器中。 2. 微波中高火6-8min。 3. 室温冷却。 4. 用PBS洗涤3次，每次5min。 二、蛋白酶K法 1. 配制新鲜溶液： 25μl 20mg/ml蛋白酶K； 2.5ml 1MTris-HCl（pH8.0）； 0.5ml 0.5M EDTA（pH8.0）； 加水定容到50ml。 2. 37℃下，将玻片放在架子上孵育5min（蛋白酶K不要预热
离心管以4000rpm离心10分钟，弃上清；加10倍体积TE洗一遍，以4000rpm离心10分钟，弃上清 ③ 加适量TE稀释 ④ 取400μl稀释液于1.5ml的Eppendorf管，缓慢加入10％SDS溶液，至终浓度0.5％ (加20μl)，摇匀直至溶液变粘稠 ⑤ 加入Rnase(200μg/ml)至终浓度20ug/ml(42μl)混匀，置37℃保温60分钟（总体积 420μl)。 ⑥ 加蛋白酶K(20mg/ml)至终浓度100ug/m1混匀(加21ul)，于50℃保温3小时
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