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- 李记生物Life-iLab
- 上海
- AP43L024
- 2026年04月25日
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-20 ℃
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12个月
- 英文名：
蛋白酶K溶液（20mg/ml）
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- 供应商：
李记生物
- CAS号：
/
- 规格：
2 mL
产品简介
蛋白酶K（Proteinase K），相对分子量约为29.3 kDa, 能够切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键，是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。较广的pH范围内（pH 4~12.5）均有活性。一般工作浓度是50~100 µg /ml，但在变性剂如1%SDS中可提高活性，所以在使用中常根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍对蛋白酶K的活力影响不大。
常用于基因组DNA的提取，脉冲电泳的染色体DNA的制备等实验。
订购信息
| 产品名称 |
货号 |
规格 |
价格 |
| 蛋白酶K溶液（20mg/mL） |
AP43L024 |
2 mL |
120 |
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文献和实验洗脱液，接着按照3.2b进行）2a.加入2ulRNaseA(0.5mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。DNA采用PCR纯化试剂盒中厂家说明进行纯化。样品冻存于-20°C.样品之所以加入RnaseA是因为高浓度RNA会在使用PCR纯化试剂盒时干扰DNA的纯化。而纯化柱子的饱和度是既定的。2b.加入5ul蛋白酶K(20mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。采用酚/氯仿抽提的DNA使用乙醇沉淀于10ul的糖原(5mg/ml).中。100ul水重悬浮。样品
一、柠檬酸钠法 1. 把玻片放在玻璃固定架上，再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠（pH6.0）的容器中。 2. 微波中高火6-8min。 3. 室温冷却。 4. 用PBS洗涤3次，每次5min。 二、蛋白酶K法 1. 配制新鲜溶液： 25μl 20mg/ml蛋白酶K； 2.5ml 1MTris-HCl（pH8.0）； 0.5ml 0.5M EDTA（pH8.0）； 加水定容到50ml。 2. 37℃下，将玻片放在架子上孵育5min（蛋白酶K不要预热
离心管以4000rpm离心10分钟，弃上清；加10倍体积TE洗一遍，以4000rpm离心10分钟，弃上清 ③ 加适量TE稀释 ④ 取400μl稀释液于1.5ml的Eppendorf管，缓慢加入10％SDS溶液，至终浓度0.5％ (加20μl)，摇匀直至溶液变粘稠 ⑤ 加入Rnase(200μg/ml)至终浓度20ug/ml(42μl)混匀，置37℃保温60分钟（总体积 420μl)。 ⑥ 加蛋白酶K(20mg/ml)至终浓度100ug/m1混匀(加21ul)，于50℃保温3小时
