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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
199
- 英文名:
Fast Site-Directed Mutagenesis Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
于-20℃条件下保存。感受态细胞-70℃
- 规格:
20次
特别提示:包括快速定点突变试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:快速定点突变试剂盒
英文名称:Fast Site-Directed Mutagenesis Kit
产品货号:WH0118
产品规格:20次
体外定点突变技术是当前生物、医学各领域研究中的一种重要实验手段,多用于改造、优化目的基因;探索启动子的调节位点;以及研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系。本试剂盒采用目前领先技术,可在目标载体上直接对靶基因进行单点突变,多点突变及插入或缺失突变,并且单点突变的突变率可达90%以上。另外,与以往的突变试剂盒需要多轮PCR及亚克隆等耗时耗力的步骤不同,本试剂盒的操作更为简便,从未突变菌株到突变菌株的构建只需要4步,如下图所示:
试剂盒提供的FastAlteration DNA Polymerase是一种快速高保真DNA聚合酶,该酶保真性能优良,灵敏度高,扩增速度可达15~30 sec/kb,并且zuì高可扩增长度为10 kb的质粒DNA。试剂盒附带的FDM感受态细胞具有体内降解甲基化质粒的功能,可以对未被Dpn I降解掉的质粒模板进行进一步的降解,因此可以保证试剂盒具有更高的阳性率。同时,本试剂盒还为客户提供了对照质粒和引物,方便客户查找实验问题。
产品特点:
·简便快速:试剂盒采用非链取代式质粒扩增技术,只需4步即可实现由非突变菌株到突变菌株的转变,而不需要多轮PCR及亚克隆等耗时耗力的步骤。
·高效引物:试剂盒采用部分重叠的引物设计原则,可以扩增得到更多的突变质粒。
·应用广泛:本试剂盒不但可进行单点突变,还可以进行多点突变,且突变点数可达5个。
·适应性强:本试剂盒zuì大可对10 kb的质粒进行定点突变,基本覆盖所有常用质粒。
·突变率高:本试剂盒具有体外和体内双重消化甲基化质粒模板的功能,可以保证更高的突变率。对于单点突变而言,本试剂盒的突变率可达90%以上。
适用范围:
·改造优化目的基因和载体;
·分析启动子上与调控蛋白结合的关键位点;
·研究蛋白质结构和功能之间的关系。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| FastAlteration DNA Polymerase(1U/μl) | 20μl |
| 5× FastAlteration Buffer | 200μl |
| Dpn I restriction enzyme(20U/μl) | 20μl |
| 4.5 kb Control plasmid(5ng/μl) | 40μl |
| Control primers(5μM,each) | 80μl |
| FDM competent cells | 20×50μl |
储存条件:于-20℃条件下保存。感受态细胞-70℃条件下保质期6个月,试剂盒其他组分在-20℃条件下保质期1年。
注意事项
1.在进行单引物多位点突变时,由于增加了突变位点个数,所以突变率较单点突变时会有所降低,根据我们的实验数据,当突变位点个数达到5个时,突变阳性率会降低到50%。因此建议客户要增加验证的克隆子数。
2.本试剂盒支持多引物多位点突变,这样可以在基因内更广泛的范围内进行突变实验。突变位点个数的上限仍然是5个。
3.建议在进行新的突变实验时要带上试剂盒附带的对照质粒和引物,以便于对实验问题进行分析。
我公司销售的快速定点突变试剂盒北京品牌,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验PCR无疑是目前最常用的实验室技术之一,而由PCR发展出来的定量PCR技术,不单有PCR的快速灵敏,还以专一性更高、可实时监控、可重复精确定量等优势而日益受到重视,越来越广泛应用于科研、检验、和诊断领域。比如像近期蔓延的猪流感之类的具有潜在高度危险的传染病等就需要快速和准确地判断病源和发展趋势,而定量PCR技术正好会逢其适,以其准确和快速的优势在各重要部门得到了广泛的采用。目前市场上定量PCR技术相关的产品琳琅满目,但大家熟悉的主要是一些国际知名品牌,其实国内许多自主研发的产品近年来也获得
样(比如 GeneArt EX 超长版就建议用 DH10B 电转感受态细胞)。市面上有多种为满足不同需求而优化条件的商品化组装克隆试剂盒,可以根据自己的需求选出最合适自己需要的——选对合适的 Kit ,每天都是好心情,实验高歌猛进充满成就感;选不合适就只能天天 re-search 了——反反复复来来回回(re-)地摸索(search)尝试,挺折磨的。选择kit时一般留意几个参数:插入片段长度,单次反应可插入片段数量,同源序列长度——即合成引物时要求添加的载体同源序列长度,反应时间,当然还有克隆效率(几个领先品牌的产品
以下操作按照天根产品 DP330 石蜡包埋组织 DNA 快速提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 石蜡切片或石蜡块2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技(北京)有限
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