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文献和实验, and 20 mMTris-HCl, pH 7.5, sterile filtered. 5. Syringe (30–50 mL) with 0.2-μm pore size filter. 2.3.2. Step 2: IMAC 1. Sample: Pooled Wnt3A containing fractions from Section2.3.1 . 2. HiTrap? Chelating, 1-mL column (GE Healthcare, Piscataway
Metallomics Using Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry
) 1 ml phenyl Sepharose column (e.g., HiTrap Phenyl HP; GE Healthcare) 1 ml Mono Q 5/50 GL column (GE Healthcare)
,取决于你的喜好和方便。1ml不好装,除非有专门的小柱子,对于直径和高度没有特别的要求,我们的做法是: 1、 GST琼脂糖凝胶FF装柱,0.7X2.5cm,柱床体积为1ml; 2、 用缓冲液1平衡5个床体积,流速为1ml/min; 3、 将10ml发酵液用缓冲液1稀释到20ml,0.45μm滤膜过滤,上样。流速为1ml/min; 4、 用缓冲液1再洗10个床体积,流速为1ml/min; 5、 用缓冲液2洗脱,流速为1ml/min,收集洗脱峰 6、 用纯水洗5个柱床体积,再用20
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