金标记兔抗人IgA(10nm/15nm)

类器官培养与应用——肝类器官

- - - - - - 10nM 10nM 10nM   hEGF - - - - - - 50ng/ml 50ng/ml 50ng/ml C029 hHGF - - - - - 10ng/ml 25ng/ml 25ng/ml 25ng/ml CJ72 B-27 - - - 1% 1% - 1× 1× 1×   A83-01

胶体金标记物的制备

体金溶液选用15000r/min 4℃离心15min，吸出上清，弃去沉淀，以去除大的聚合物。 （2）一般在10nm以上所标记的胶体金均可在调整离心机上离心，小于10nm颗粒的胶体金用超速离心机离心，在4℃离心1h左右，弃上清，将沉淀以原体积的0.02mol./L TBSpH8.2（内含1%BSA，0.05%叠氮钠）溶解，重复离心2～3次，沉淀溶于原体积的1/10TBS中。4℃保存备用。为了得到颗粒均匀一致的免疫金试剂，上述粗提制剂可用10%～30%蔗糖或甘油溶液作密度梯度离心，分带收集不同大小颗粒的胶体金标记

做了这么多的 WB，你知道化学发光和荧光可以一起检测吗？

性。 除了同时检测化学发光和荧光目的条带。这个功能有什么更普遍的应用呢？ 有，那就是进行总蛋白归一化（Total Protein Normalization, TPN）。在一张膜上，用荧光检测总蛋白，用化学发光检测目标蛋白条带，使用 iBright 成像系统拍摄的图片如下。同一张膜上进行操作，信号互不干扰，结果又快操作又方便。 图3. 用各种试剂处理 HCT116 细胞：HCT116 血清饥饿 24 小时，并用 LY294002（50μM，1小时）、雷帕霉素（10nM，1小时）和/或 BEZ235 （500nM