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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Fusarium graminearum
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
-20度
- 规格:
50次
中文名称:禾谷镰刀菌PCR试剂盒
英文名称:Fusarium graminearum
规格:50次
运输:低温
保存:-20度
有效期:一年
货期:一周
产品及特点
1.即开即用,用户只需要提供样品模板,操作简单,定量准确快速。
2.荧光定量 PCR 检测,反应特异性强。
3.提供阳性对照,便于分析实验结果。
4.PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳,本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
运输及保存
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
使用方法
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取细菌样品 DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 stn 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
1.标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2.用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(最好用带芯枪头,下同)。
3.先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
1.在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
2.换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5 拷贝/μL 的阳性对照。
3.换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。
4.NC 管中不加任何阳性对照。
5.从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值, 并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
一.PCR 检测(20 μL 体系)
1.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次)
注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照,其他荧光 PCR 仪器(如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480)不需要使用 ROX。
建议 PCR 反应参数(具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化)
3. 数据采集
按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,最大吸收光谱在 471 nm,结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm, 最大发射光谱在 530 nm。
四、数据处理
以 stn 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
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文献和实验禾谷镰刀菌(有性型为玉米赤霉)是一种小麦和大麦赤霉病的致病菌种。真菌有性生殖产生的繁殖芽体子囊孢子,是初侵染的主要根源。因此在无菌条件下收集大量子囊孢子是研究真菌子囊孢子发育进程的前提条件。 本视频来源于网络,如有异议请联系我们,我们将在5个工作日内作出处理。
和排列方式、附属丝的类型和形态等,白粉菌科下分有性型 19属,无性型 4属。中国除巴西白粉菌属和尖钩丝壳属两个热带属外均有发现,其中球钩丝壳属、顶叉钩丝壳属、小钩丝壳属和旋梗菌属为中国建立的新属。 白粉菌很可能起源于与广口盾壳科的祖先相近的真菌。它的全部已知种均为高等植物的专性寄生菌,尚不能完全脱离寄主在合成培养基上人工培养。它们可以寄生在近万种的种子植物上,给很多经济作物带来危害。习见的有为害禾谷类的禾谷布氏白粉菌,为害葡萄的葡萄钩丝白粉菌,为害苹果的苹果白粉菌等。
上位,各有一基底腹侧着生的弯生胚珠,具两层珠被及厚珠心。果实为1~4个的小形核果或瘦果,胚常具很发育的胚轴,无胚乳。染色体基数x = 7(?),13~15。有2属,其中眼子菜属有100种,广布于世界各地。另一属(Gr ceniandia)仅1种,见于欧洲西部、非洲北部、亚洲西南部,也可归入眼子菜属。 眼子菜(参见彩图插页第125页)中医学上用于清热解毒,繁生于稻田中时,有害禾谷。过去归入眼子菜科的川蔓藻属(Ruppia),角果藻属,大叶藻属,虾海藻属(Phyllospadix
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