单克隆抗体制备

基础牢，筛选更广并精准，我平台从细节处自律要求高（进口体系十年以上技术人员经验积累），技术储备充足。
很多抗体降解问题等因素，筛选细胞部分实验不稳妥。
实验要求可邮件沟通

 

20240620

单克隆简易方法，新手操作一遍过，图片是新手第二次验证图。

细胞系验证按说明就可以，原代耐药株等可讨论痛点，

图二要点说明，两堆细胞，不生长单个的就不建议克隆，那堆生长顺利的，后面会生长顺利

留邮箱及实验室名称，后期稳转株POTOCOL出来，合作原代建系，

痛点讨论：离体处理、培养体系，稳转株药加量筛选稳转株、冻存复苏要点及各实验室验证陆续会有反馈数据。

离体活性更高可行方案：难消化下来大部分问题是活性这部影响的

培养方案：含血清可行性，可同时无血清同步

稳转株：超量加药筛选，

冻存复苏：基于DMSO方案，对冻存挑剔细胞系，原代高活率方案，无血清方案新型冻存液方案对比及问题统计

上述包括内容较多，这里不展开。十年细胞问题统计后呈上。

 

20240628
成瘤前细胞优化参考
成瘤前精筛选与粗筛选
这两种方法都很简单
精筛选：单克隆筛选，细工potocol方法简单，我这个案例新手一遍就过，用户给张单克隆图，我们也行参与分析。（列出试剂耗材，操作概述，生长情况）我们给些建议，要能给出厂家货号，我们给出备份厂家及货号
粗筛选：成瘤不稳定组参考，让假株经长时间培养后死掉，不用管它，通过长时间慢长起来的，都是克隆小岛汇合细胞，前几代慢培养可能慢，慢慢长起来后，就会顺利生长。这个注意事项是慢长后容易成片，这是胰酶对细胞伤害很重要，我那个胰酶是重点解决问题配套试剂（胰酶敏感细胞筛选统计应用过：难养系，如上皮、肝类、胰岛胰腺类、巨噬类、腺类、胶质类、免疫悬浮、乳腺上皮类、SV40,hTERT、原代类。胰酶敏感细胞生长特性：成团成片，堆叠式生长，锚着不牢，锚着太牢消化太久的，如何避免胰酶损伤，不能重做的可培养板加层血清解决，原代建系要考虑长久实验需求的，我们可讨论提高组织-细胞挺高活性，无外力（化学，机械）力可行性，原代建系我们重点室，药厂多家实验室共同验证方案更可行，肝，胰岛胰腺已开始筹备杭州，上海，广州，北京开始统计合作实验室，先行通点统计沟通可行方案，理论上全过并相关预实验验证顺利后，一起完成建系实验，药厂拿走细胞可行方案，科研拿走文章，细工完成实施，
粗筛选简述
瓶，慢养慢传代慢生长，无损胰酶，少二氧化碳，减缓生长，减缓分化，理由：来自成干成球培养，难养细胞株痛点统计规律相似特点。分出一批评测，操作更简单，给成瘤不稳定组，提供一组备份条件，从成干特点上看（缺氧培养减缓细胞分化-这个特点又能起到明显作用后，我们可能考虑离体后巨噬培养看看能否控制细胞分化，后面给生产型用户做些技术储备），优势挺大的，也给出一套备份技术储备。
备注：如您对干细胞培养相关了解，相关参考也可发我下，我们一起验证优略。该思路来源类器官统计可行性及目前试剂耗材国产普及，我们目的是国产试剂耗材原代建系。冻存复苏优化应该也是原代建系中重点，相关问题心得都可讨论。

更多统计内容：培养箱技术检测（老培养箱二氧化碳给量过大普遍存在），二氧化碳厂家纯度，遇到过低级别二氧化碳，问题找了两年，试剂四处评测，最后是二氧化碳问题，建系是严谨活，每个细节到位，有必要国内四个正规库我们都能请来技术支持，包括细分领域大牛实验室合作，学习请教问题十多年了，每每都能如愿。
例如：国产试剂耗材以前很少统计，现在有些高质量的也可完成相关统计。

试剂耗材我们分种子库级别，和普通级别，后面问题沟通请先说明试剂级别，两种我们后续都有统计，例如单克隆图，准株，假株比例多少，就能判断整体细胞水平，结合耗材手法判断，即便使用种子库级别试剂耗材，细胞处理过要求快，细胞也会假株数量增多，为更优结果，啰嗦这莫多，为建系做好充足准备，各位技术多多支持，没必要藏着哈，特斯拉要不公布专利，自己打败油车，得五百年（刚学完清华总裁班）。现在每年毕业生这莫多，没点震撼突破，不行的。

基质胶国内生产合作
目前已有细胞工厂生产公司，能否加条合作生产线，维持培养上清项目合作，没能力建自己的工厂，可项目不错，超长时间维持培养后，上清开发配套因子、外泌体、基质胶、ADC等科研得一些产品，我们自己业务就是各种细胞培养问题统计与配套产品开发，我们增强贴壁试剂配套细胞工厂生产优势很大，工业应用也有不少，也可接些发酵罐生产转成细胞工厂应用含血清上游开发，这个优势是细胞缓冲能力强，生长完全控制（长、停、维持）这类到终末收前可换成无血清，维持培养比无血清时间会长很多。