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超声化鲑鱼精单链DNA

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    美国GENMED主要运用世界上最尖端的基因综合技术平台(数字化染色体基因型完全分析技术、表观基因组完全分析技术、染色体单体分离分析技术、基因靶标技术、全基因表达完全分析技术、RNA拼接图谱综合分析技术、SiRNA完整表达文库构建技术、细胞抗原谱学技术、胶体金层析法金标技术、蛋白激酶组学完全分析技术、蛋白表位标记技术、Seldi蛋白质谱分析技术、高容量细胞荧光筛选技术、高通量远红外细胞免疫筛选技术),从事疾病指纹诊断系统、农作物种子改造和分子操作、生物反应器、中草药和海洋生物抗肿瘤活性物质筛选、基yin检测中心、技术平台服务和培训等独步天下的杰美产品和服务体系的开发,以期成为基因医学产业化的领军企业。
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    • 如何做好 Southern 杂交?

      液(8 cm × 8 cm 的膜加 5 mL 即可),将膜的背面贴紧杂交瓶壁,正面朝向杂交液。放入 42 ℃ 杂交炉中,使杂交体系升到 42 ℃。取经超声粉碎的鲑鱼精 DNA(已溶解在水或 TE 中)100 ℃ 加热变性 5 min,迅速加到杂交瓶中,使其浓度达到 100 μg/mL。继续杂交 4 hr。鲑鱼精 DNA 的作用是封闭 NC 膜上没有 DNA 转移的位点,降低杂交背景、提高杂交特异性。2.杂交倒出预杂交的杂交液,换入等量新的已升温至 42 ℃ 的杂交液,同样加入变性的鲑鱼精 DNA。将探针

    • 毕氏酵母氯化锂转化法

      0.8; 4. 室温下3000g离心收集酵母菌体,50ml缓冲液A洗涤一次; 5. 重悬菌体于4ml缓冲液A中,按0.2ml/管分装于1.5ml的离心管中,每管加入11ulDMSO,混合后迅速于液氮中冷冻, 6. -70℃保存 毕氏酵母的转化 1. 将约50ug线性化质粒DNA溶于20ul TE或水中,直接加于冻结的酵母细胞中;加入担体DNA(40ug变性超声线性化鲑鱼精DNA)以获得最大转化率; 2. 37℃水浴孵育5min,中间混合样品1~2次;

    • 交联染色质免疫共沉淀(X-ChIP)实验设计

      珠子对照样品外每个样品中加入一抗,抗体的量按照以往经验来加,1-10ug的抗体/25ugDNA效果较好。3加入20ul的proteinA/G珠子(预先用超声处理成为单链的鲱精DNA和BSA吸附,详见步骤4.3a)到所有样品总,4°C摇转IP过夜。3a将蛋白A/G珠子与单链鲱精DNA进行预处理。如果同时使用蛋白A珠子和蛋白G珠子,等体积混合这两种珠子使用RIPA溶液洗3次。除去RIPA溶液,加入单链鲱精DNA到珠子终浓度为75ng/μl,再用BSA将珠子终浓度定到0.1μg/μl。加入两倍珠子

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