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多肽的N端测序

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  • 全国
  • 蛋白质、多肽的鉴定测序分析制备
  • 2025年07月08日
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    • 服务名称

      蛋白质分析

    • 提供商

      北京泰联生物科技有限公司

    • 规格

      微信联系13241781249

    制药企业———免费抗体测序
     
    (药审项目——N末端测序)
     
    (长期合同——前半年样品检测全免费)
     
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                                                    公司技术服务项目汇总


     
    项 目 名 称 单  价 备  注
    N末端测序(Edman) —— 活性,多肽,蛋白等
    N/C端测序(质谱法) —— 抗体,新蛋白等
    全序列测定(Edman) —— 抗体,新蛋白等
    全序列测定(质谱法) —— 抗体,新蛋白等
    蛋白多肽全组分鉴定 —— 多肽,蛋白等
    二硫键+Cys定位分析 —— 定位,数量分析
    氨基酸定性定量分析 —— 20种或50种氨基酸
    糖基化修饰分析(N糖) —— 修饰位点与数量
    圆二色谱分析 —— CD 180-260nm
    等电点分析 —— 全柱成像毛细管电泳
    HPLC分析(多种技术) —— RPC,SEC,IEC,HIC,AC
    HPLC制备(多种技术) —— 半制备柱
    电泳制备转膜 —— 还原电泳
    焦谷氨酸肽酶去Q环化 —— N端Q环化修饰
    其他前处理————浓缩,脱盐,酸化处理,烷基化,酸水解等

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    项目1 :蛋白质/多肽/抗体的N端序列分析

                                     Edman法N末端序列分析

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    检测仪器: (总计4台套)
    岛津 PPSQ-53A 蛋白多肽自动测序仪(1#)
    岛津 PPSQ-33A 蛋白多肽自动测序仪(2#)
    岛津 PPSQ-33A 蛋白多肽自动测序仪(3#)
    岛津 PPSQ-31B 蛋白多肽自动测序仪(4#)

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    主要应用:
    1、抗体药物申报:抗体的 N 末端氨基酸序列情况判断
    2、全序列测定:N末端连续 70 个以上氨基酸序列测定
    3、应用领域:药物申报,生物药研发,海关检验,食品药品监测
    4、其它应用:结构验证,酶切位点寻找,断点寻找,环化与否,半胱氨酸二硫键判断,活性区域


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    样品要求:
    1、含量: 200 -1000 Pmol (15个AA--70个AA)
    2、形式: PVDF膜;液体;干粉
    3、封闭: N端未被封闭(如Q修饰,N端环化,甲酰化,乙酰化等)
    4、干扰: 不能含有蛋白酶,氨基酸,胺,盐分,去污剂等


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    提供信息:
    1、样品来源: 表达重组,天然,合成等 
    2、样品含量: 浓度,含量(或者紫外吸收情况)
    3、样品纯度:SDS或者HPLC及质谱图谱
    4、制备方式: 简单提取流程,各步骤结果及图谱
    5、样品溶解性:常规溶剂,难溶溶剂  
    6、其他:稳定性,毒性,腐蚀性;可能杂质,预测结构,分子量等

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    项目2: 蛋白质/多肽等大分子的质谱分析
     
       
    蛋白质、多肽、抗体等生物分子的质谱鉴定测序分子量等

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    检测仪器:
    基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱仪 MALDI-TOF-TOF
    高性能定性定量质谱仪 AB Sciex Triple TOF 5600+
    电喷雾组合型离子阱质谱仪 Q Exactive™ Hybrid Quadrupole-Orbitrap™ MS


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    检测对象:
    1、抗体,融合蛋白质
    2、合成小肽,天然活性小肽
    3、酶解后的肽片段


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    检测项目:
    1分子量精确测定;          6、二硫键定位检测
    2、高通量蛋白鉴定;          7、半胱氨酸检测
    3、 N 序列测定;           8、肽段覆盖率
    4、 C 序列测定;           9、肽质量指纹图谱
    5、多肽全序列测定;


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    样品要求:
    1、样品含量:50-1000 Pmol (根据检测项目而定)
    2、样品形式:液体,干粉,胶粒/条带
    3、纯度要求:95%以上


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    客户提供信息:
    1、来源: 天然,合成,表达(及其理论序列)
    2、含量: 浓度,含量(或者紫外吸收情况)
    3、溶解性:常规溶剂,难溶溶剂
    4、特征:分子量,等电点,可能杂质,可能修饰,可能结构等
    5、制备方式: 简单提取流程(SDS;HPLC;酶解;其他)


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    项目3:   蛋白质/多肽的液相分离纯化
                      
             
    蛋白质、多肽、抗体等生物分子的分离纯化制备

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    使用仪器:
    快速蛋白纯化系统 ÄKTA Avant 25
    快速蛋白纯化系统 ÄKTA Explorer100


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    纯化对象:
    1天然蛋白质/多肽等
    2、合成多肽/小肽等
    3、具有活性的天然提取混合物
    4、带标签的融合蛋白抗体


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    纯化技术与条件:
    1离子交换——HiTrap HP柱,Mono柱,含Q,DEAE,ANX,S,SP,CM等填料
    2、凝胶层析——Superdex 30/75/200柱,Hiprep 30/75/200柱等
    3、亲和层析——His标签柱,GST标签柱,含分析制备级别
    4、疏水层析——Phenyl,Butyl,Octyl各种填料柱子
    5、反相层析——C3,C4,C8,C18各种填料的柱子


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    样品要求:
    1、样品含量:足量(根据后期研究需求而定)
    2、样品形式:液体;干粉
    3、室温稳定性好


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    客户提供信息:
    1、样品来源: 动物、植物、微生物;天然,合成或表达等
    2、样品含量: 浓度,含量(或者紫外吸收情况)
    3、样品溶解性:常规溶剂,难溶溶剂
    4、目标物分子量,等电点,活性情况
    5、制备方式: 简单提取流程,SDS或者LC及图谱
    6、其他信息:稳定性,毒性,腐蚀性;可能杂质,预测结构等


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    项目4:  高效液相色谱分析(HPLC)

                 蛋白质、多肽、代谢物等生物分子的HPLC分析

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    检测仪器:
    安捷伦高效液相 Agilent 1200 HPLC

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    主要应用:
    1、蛋白质/多肽的纯度鉴定
    2、蛋白质/多肽的定量分析
    3、天然/合成样品的纯度检测
    4、蛋白质/多肽的指纹图谱分析
    5、单糖/寡糖/多糖定性定量分析
    6、混合物/粗提物分子量分布分析
    7、代谢组分/小分子指纹图谱分析
    8、蛋白/多肽/糖类的少量纯化制备


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    样品要求:
    1、样品含量: 50 Pmol-1000 Mmol (从ng分析到g级制备)
    2、样品形式: 液体或干粉;纯品或混合物;


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    客户提供信息:
    1、样品来源: 表达,天然,合成;动物、植物、微生物等
    2、样品含量: 浓度,含量(或者紫外吸收情况)
    3、提取方式: 简单提取流程,各步骤结果及图谱
    4、样品溶解性:常规溶剂,难溶溶剂                                    
    5、其他:稳定性,毒性,腐蚀性;可能杂质,预测结构,分子量等


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    • 多肽立体化学--螺旋多肽

      采用模型系统进行研究,可以得到对蛋白质的立体化学有贡献的实质性理解。合成多肽为确定与蛋白质的结构和功能有关的构象及相互作用,提供了颇具吸引力的途径。 螺旋结构是蛋白质、核酸、多糖及许多合成多肽的共同结构特征。研究模型多肽在固态和溶液中的螺旋结构,对明确解释在纤维蛋白和球蛋白的构象研究中得出的结论具有重要意义。 多肽是由α氨基酸按下面的通式组成的聚酰胺,其中R是α氨基酸中的侧链: 根据下面的基本假定,Pauling和Corey设想α-螺旋是折叠多肽比较稳定的二级结构之一: 多肽残基是反式共

    • 多肽的基本常识

      保存:   大多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。   对于含Cys, Met orTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽可易空气氧化, 在封瓶前,慢慢流过多肽的氮气或氩气也会降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有这些肽与不含这些有问题解苷的那些肽相比,生命期有限。 溶解性:   大多肽的道选溶剂是超纯

    • 多肽

        指许多氨基酸单位用肽键互相连接构成的长链。肽和蛋白质没有严格的界限,一般把只含有数十个或更少个氨基酸单位的多肽叫做肽,把氨基酸单位比较多的多肽叫蛋白质。常把多肽中的氨基酸单位叫做氨基酸残基,因为这些单位在互相连接时已失去分子的一部分,而不是完整的氨基酸了。只有肽链两端的氨基酸残基才含有自由的α -氨基或自由的α -羧基。有自由α -氨基的末端残基叫做氨基末端(或 N端)残基,有自由α -羧基的末端残基叫做羧基末端(或 C端)残基。给多肽命名时按照从 N端到 C端残基的顺序

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