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N139
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文献和实验大鼠甲状腺素 (T4) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中 甲状腺素(T4) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 大鼠甲状腺素 (T4) 水平。用纯化的 大鼠甲状腺素 (T4) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 甲状腺素 (T4) 抗原,再与 HRP 标记的 甲状腺素 (T4) 抗体
作用,当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3'→5'外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸。在某些T4噬菌体突变株中DNA复制的真实性降低,而易发生突变,从此突变株分离得到的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性很低。相反,另外一些具有抗突变能力的T4突变株中的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性比野生型高得多,因此,其DNA复制真实性好,变异率低。可见,3'→5'外切
的DNA,70°C温育5分钟,冰上冷却后,再加入20个单位的T4多聚核苷酸激酶,37°C温育30分钟。 怎样才能提高PCR产物平滑末端的连接效率? 载体应该去磷酸化以降低自身环化,插入片段的5"末端应具有磷酸基。其它提高连接效率的方法还有:降低ATP在连接反应缓冲液中的浓度,增加插入片段与载体的比例或使用快速连接试剂盒(NEB #M2200)。另外,可使用平端克隆试剂盒(NEB #E0103)。 VentR或Deep VentR DNA聚合酶产生平滑末端,可是我要
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