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上海邦景
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文献和实验。如今市面上只有Cruiser™和Surveyor两个品牌。因为Cruiser™价格合适，且相比于进口代理产品拥有货期短的优点（国内可以2-3天内到货），做到真正质优价廉。 据了解，另一种被广泛应用于基因敲除筛选的X酶，其最早并不是为了做基因敲除筛选而生产的。它除了识别错配外，还可以识别十字型结构 DNA、Holliday 结构或交叉 DNA、异源双链 DNA，正是因为这个特点，很容易导致假阳性的现象。 图1. Holliday交叉（Holliday junction），无错配结构
【交流】阳性克隆筛选方法汇总——基于ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9基因敲除方法
保证是必要的，防止产生假阳性的结果。 4、 选择高特异性的错配酶 目前用的比较多的是CEL I和T7E I 两种酶，CELI是植物来源的一种特异性识别碱基错配的酶，活性高，不会产生假阳性。目前市面上只有CruiserTM和Surveyor和两个品牌。其中Surveyor是进口代理产品， 价格较贵，货期较长；CruiserTM价格合适，同时货期短，国内可以2-3天内到货，做到真正质优价廉。 T7E I是NEB的产品，最早并不是为了做基因敲除筛选用的。其最主要的特点是除了识别错配外
的克隆，可以很容易观察到2条分开的条带。 Taq酶，建议是用NEB的Fusion或者Q5，毕竟敲除本身很大可能也就是2-3个碱基的缺失，所以，高保证是必要的，防止产生假阳性的结果。 4、选择高特异性的错配酶； 目前用的比较多的是CEL I和T7E I 两种酶，CEL I是植物来源的一种特异性识别碱基错配的酶，活性高，不会产生假阳性。目前市面上只有CruiserTM和Surveyor和两个品牌。其中Surveyor是进口代理产品， 价格较贵，货期较长
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