酒精性肝病动物模型

专业承接各类裸鼠、大鼠、小鼠、兔等动物模型建立以及后续检测服务，模型建立包含裸鼠皮下瘤、原位瘤、糖尿病模型、胃炎模型、急性肺损伤、肺纤维化、子宫内膜异位、白癜风、痛风、骨缺损、肝纤维化、关节炎、脓毒症、支气管哮喘、抑郁症、白血病、脑缺血再灌注、骨质疏松、酒精性肝病、学习记忆障碍、胃溃疡、急性心肌缺血、感染性休克、肝硬化等动物实验模型建立，以及后续各项检测。

  在生命科学研究领域内，进行实验研究所需要的基本条件可以总括为：实验动物、设备、信息和试剂。实验动物作为生命科学研究中的基本要素之一，在很多领域的科学研究中，充当着非常重要的安全试验、效果试验、标准试验的角色，尤其在药物有效性和安全性评价中发挥着不可或缺的作用。

  安徽乐奥贝生物技术公司可以独立开展包括大鼠、小鼠、裸鼠、豚鼠、兔等常见实验动物在内的动物造模及相关实验，现已熟练掌握近30余种不同类型动物模型的造模方法。

1. 酒精性肝病动物模型的造模方法
   • 液体饲料法
     • 原理：通过在动物饲料中添加高浓度酒精，使动物长期摄入大量酒精，模拟人类酗酒行为，从而诱导酒精性肝病。这种方法能够较好地控制酒精摄入量，并且可以持续给予动物酒精刺激。
     • 具体操作：以大鼠为例，配制含酒精的液体饲料。通常将酒精（一般使用乙醇）浓度控制在 5% - 30% 左右，同时保证饲料中的其他营养成分，如蛋白质、脂肪、碳水化合物等的比例适当，以维持动物正常生长所需营养。动物自由摄取这种液体饲料，造模时间一般需要 8 - 16 周左右，随着时间的推移，动物肝脏会逐渐出现酒精性肝病的病理变化。
   • 灌胃法
     • 原理：直接将一定浓度和剂量的酒精溶液通过灌胃的方式给予动物，强制动物摄入酒精，快速增加动物体内酒精负荷，引发肝脏损伤。
     • 具体操作：选择合适的动物，如小鼠或大鼠。用乙醇配制成一定浓度的溶液，通常乙醇浓度在 40% - 60% 左右。按照动物体重计算灌胃剂量，一般小鼠每次灌胃剂量为 0.1 - 0.3ml/10g 体重，大鼠每次灌胃剂量为 1 - 2ml/100g 体重。每天灌胃 1 - 2 次，持续 4 - 8 周后，动物肝脏会出现脂肪变性、炎症等酒精性肝病的表现。
   • 腹腔注射法
     • 原理：酒精通过腹腔注射进入动物体内后，迅速被吸收进入血液循环，然后通过肝脏代谢，短时间内对肝脏产生毒性作用，诱导酒精性肝病。
     • 具体操作：将乙醇用生理盐水配制成合适浓度的溶液，如浓度为 20% - 40%。以小鼠为例，按照每 10g 体重注射 0.2 - 0.4ml 的剂量进行腹腔注射。注射频率可以是每天 1 - 2 次，持续一段时间后，肝脏会受到酒精的损害，产生相应的病理变化，但这种方法容易引起动物腹膜炎等并发症，需要谨慎操作。
2. 模型评价指标
   • 血液生化指标
     • 转氨酶升高：谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）是反映肝细胞损伤的重要指标。在酒精性肝病动物模型中，随着肝脏损伤的加重，ALT 和 AST 水平会显著升高。例如，正常大鼠 ALT 水平一般在 30 - 50U/L 左右，AST 水平在 40 - 60U/L 左右，在模型动物中，ALT 和 AST 可能会升高到 100 - 200U/L 甚至更高。
     • γ - 谷氨酰转肽酶（γ - GT）和碱性磷酸酶（ALP）升高：这两种酶在酒精性肝病时也会升高，它们主要反映胆管系统的损伤和肝细胞的分泌功能障碍。正常小鼠 γ - GT 水平约为 10 - 30U/L，ALP 水平约为 50 - 100U/L，在模型动物中，γ - GT 和 ALP 可能会升高 1 - 2 倍。
     • 甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）升高：长期饮酒会导致肝脏脂质代谢紊乱，血液中的 TG 和 TC 水平升高。正常大鼠 TG 水平一般在 0.5 - 1.0mmol/L，TC 水平在 1.5 - 2.0mmol/L，在酒精性肝病模型动物中，TG 和 TC 可能会分别升高到 1.5 - 2.0mmol/L 和 2.5 - 3.0mmol/L。
   • 肝脏组织病理学指标
     • 脂肪变性：这是酒精性肝病早期最常见的病理变化。通过 - 伊红（HE）染色或油红 O 染色可以观察到肝脏细胞内出现大小不等的脂肪滴，将细胞核挤向一侧。在液体饲料法造模 4 - 8 周时，就可以看到明显的脂肪变性。
     • 炎症细胞浸润：随着病情进展，肝脏组织中会出现炎症细胞浸润，主要是中性粒细胞和淋巴细胞。在炎症区域，细胞形态发生改变，组织出现水肿。一般在灌胃法造模 6 - 8 周后，炎症细胞浸润现象较为明显。
     • 肝纤维化：在酒精性肝病的后期，会出现肝纤维化。通过 Masson 染色可以观察到肝脏组织中有大量胶原纤维沉积，形成纤维间隔，将肝小叶分割成不规则形状。这种变化在造模 12 - 16 周后比较显著。
   • 肝脏功能指标检测
     • 肝脏代谢功能：检测肝脏对药物（如安替比林）的代谢能力，在酒精性肝病时，肝脏代谢功能下降，药物代谢速度减慢。可以通过检测血液中药物及其代谢产物的浓度来评估肝脏代谢功能。
     • 胆汁分泌功能：通过胆管插管收集胆汁，观察胆汁分泌量和成分变化。在酒精性肝病动物中，胆汁分泌量可能减少，胆汁中胆盐、胆红素等成分的比例也可能发生改变。
3. 酒精性肝病动物模型的应用领域
   • 发病机制研究：用于研究酒精性肝病的发病过程和机制，包括酒精在肝脏中的代谢途径、酒精及其代谢产物如何引起肝细胞损伤、炎症反应和纤维化的分子机制等。
   • 药物筛选和治疗评价：可以在模型动物上测试治疗酒精性肝病的药物，观察药物对肝脏损伤的修复作用、对血液生化指标的改善情况以及对肝脏组织病理学变化的逆转效果，从而筛选出有效的治疗药物。