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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
244
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
人弹性蛋白微原纤维界面因子1(EMILIN1)ELISA试剂盒检验方法:
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2. 取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3. 空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀,置37℃反应30分钟。
5. 扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7. 洗涤,同步骤5。
8. 每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9. 每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
我们常说人弹性蛋白微原纤维界面因子1(EMILIN1)ELISA试剂盒检测的灵敏度主要是由原料决定的,虽然检测试剂盒也可以通过调整浓度以及其它条件进行改善。但遇到批间差异大的问题,就是要原料质量过关,原料的批和批之间差异不能太大,还有就是用于生产的工艺要简单,重复性,这样可以尽量减少批间差异。所以说原料特别重要,只要是原料无论抗体和抗原都很重要。
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文献和实验微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。 四、温育 温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素
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