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- gelatins
- 科研试剂
- JC-A7651
- 上海
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
242
- 适应物种：
人/动物/植物等
- 应用：
用于科研试剂实验
- 检测方法：
elisa法
- 检测范围：
科研试剂
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
48T/96T
人乳腺癌易感蛋白1(BRCA1)ELISA试剂盒检验方法：
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2. 取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3. 空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀，置37℃反应30分钟。
5. 扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
7. 洗涤，同步骤5。
8. 每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
9. 每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。
我们常说人乳腺癌易感蛋白1(BRCA1)ELISA试剂盒检测的灵敏度主要是由原料决定的，虽然检测试剂盒也可以通过调整浓度以及其它条件进行改善。但遇到批间差异大的问题，就是要原料质量过关，原料的批和批之间差异不能太大，还有就是用于生产的工艺要简单，重复性，这样可以尽量减少批间差异。所以说原料特别重要，只要是原料无论抗体和抗原都很重要。
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文献和实验：使用 Anti-phospho-Akt (Ser473) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。（图 A）使用免疫组化试剂盒M&R HRP/DAB Detection IHC Kit，抗体 1:100 稀释；(图 B) 采用普通免疫组化试剂盒，抗体 1:25 稀释。 图 6 免疫组化实验检测 Erk1/2 表达 注：使用 Anti-Erk1/2 Mouse mAb与p44/42 MAPK （Erk1/2）Rabbit mAb 对正常小鼠心脏组织进行免疫
2抗最好别用mouse的，用兔的试试应该更好。 再有，如果你的趋化因子是分泌性的，建议用ELISA试试。 谢谢你的建议 我的sample是人乳腺癌细胞的蛋白，一抗为羊抗人，二抗为兔抗羊，跟你提的建议一致，问题在该趋化因子的单抗从来都没用于实验，不敢买， 这个趋化因子包括跨膜型和分泌性两种，分泌性的我用ELISA测过，结果跟预期相符，但我的课题主要关注的是跨膜型的所以得把Western blot 做好
（ALIX）、肿瘤易感基因 101 蛋白（TSG101）、热休克蛋白（HSP70、HSP90），以及细胞分泌的特异性蛋白。其中 CD9、CD63、HSP70、TSG101 是外泌体常用的鉴定蛋白。 流式细胞术检测：外泌体可以先进行荧光标记，再通过流式细胞仪检测外泌体表面标记蛋白。但是传统的流式细胞仪检测样本的颗粒大小是 300-500 nm，而外泌体直接都在 300 nm 以下，因此，可能大量的外泌体检测不到，造成分析不太准确。 ELISA 检测 ：根据外泌体的表面标志物，如 CD9、CD63 进行
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