支原体双向去除

支原体预防&去除试剂选购指南

污染不除，实验结果势必或多或少产生偏差，故进行实验前，确定细胞为mycoplasma-free至关重要，实验结果之数据才有意义。 支原体污染一般来源于血清，实验仪器、培养基或其他试剂蔓延开来。怎样预防和去除支原体污染呢？一般只有三种抗生素(四环素，大环内脂和喹诺酮)能有效对付支原体。在低浓度时，这些抗生素不会产生耐药性，且对哺乳动物细胞的毒性较小。四环素和大环内酯能结合30S和50S核糖体亚基，从而抑制蛋白质合成，喹诺酮抑制DNA旋转酶。因此可以在细菌DNA复制及蛋白质合成两个层面上抑制

支原体污染的特点及检验（3）

这在我们实验室是不可能使用的方法；有些文章是联合使用两种抗生素来清除支原体，简单方便，我就试了这种。 关于检验支原体污染，有PCR法、培养法、DNA荧光染色法，我选择的是DNA荧光染色法，将冰醋酸和甲醇按1:3混合，固定细胞两次，每次10分钟，然后用1μg/ml的Hoechst33258染色20分钟，紫外激发，确认了我的细胞中生长最好的都有支原体污染。于是我花1.5元买了环丙沙星（ciprofloxacin）药片，稀释成50μg/ml，离心去除淀粉之类的不溶性辅料，加入培基中，稀释成10μg/ml，跟正常

细胞培养中的生物污染

分析可以 确定细胞培养物中是否存在交叉污染。 请勿在常规细胞培养中使用抗生素，因为抗生素的连续使用会促进耐药菌株的生长，并导致轻度污染持续存在。一旦将抗生素从培养基中去除，就会发展成大规模污染。抗生素的持续使用还可能掩盖支原体感染和其他隐性污染。此外，某些抗生素可能会与细胞发生交叉反应，干扰正在研究的细胞过程。 抗生素只能作为对付污染的最后手段且只能短期使用，并应尽快从培养物中去 除。如果长期使用抗生素，则应同时进行无抗生素培养，作为检测隐性感染的对照。 文章来源：赛默飞世尔科技