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霍乱弧菌通用PCR试剂盒

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  • YBio/钰博生物已认证
  • 中国
  • 2025年07月16日
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      Vibrio cholerae

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      上海钰博生物科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃保存

    • 规格

      50次

    霍乱弧菌通用PCR试剂盒
    Vibrio cholerae

    产品简介:
    霍乱弧菌(Vibrio cholerae)是革兰氏阴性菌,菌体短小呈逗点状,有单 鞭毛、菌毛,部分有荚膜。霍乱弧菌是人类霍乱的病原体,霍乱是一种古老 且流行广泛的烈性传染病之一。曾在世界上引起多次大流行,主要表现为剧 烈的呕吐,腹泻,失水,死亡率甚高。属于国际检疫传染病。本产品是根据 PCR 原理开发的霍乱弧菌通用检测试剂盒,它具有下列特点:
    1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
    2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩霍乱弧菌,与其他病原没有交叉反应。
    3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
    4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
    5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

    产品细节图片1
    规格及成分:
    成 份 编号 十孔盒包装
    PCR MagicMix 3.0 90805 1 mL(红盖)
    超纯水 100935 1 mL(亮黄色)
    霍乱弧菌通用PCR 引物混合液 13-14830yw 100 μL(白盖)
    霍乱弧菌通用PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) 60908-14830pc 50 μL(黄盖)
    使用手册 13-14830sc 1份

    运输及保存:
    低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
    自备试剂:
    样本DNA。
    使用方法:
    一、样品 DNA 的制备

    1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。
    2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 霍乱弧菌通用 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释 液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放 冰上待用。
    二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
    3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

    成分
    样品管
    N+2 个
    PCR
    阴性对照
    PCR
    阳性对照
    PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL
    霍乱弧菌通用PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL
    N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - -
    PCR 阴性对照( - 18 μL -
    PCR 阳性对照(霍乱弧菌通用PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液)
    -

    -

    18 μL

    4. 按下表设置 PCR 反应:
    过程 温度 时间
    预变性 95℃ 5 min

    PCR 反应
    (35 个循环)
    95℃ 30sec
    58℃ 30sec
    72℃ 30 sec
    最后延伸 72℃ 7 min
    产品细节图片2
    三、电泳检测
    5.
    取 10-20 μL PCR 产物。2%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提 供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。
     

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