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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW264.7
- 细胞类型:
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW264.7
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
RAW264.7
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
永久
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW264.7
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
/
- 物种来源:
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW264.7
- 相关疾病:
/
- 组织来源:
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW264.7
- 规格:
T25培养瓶
此细胞株源自BALB/c小鼠由Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。可产生溶菌酶;sIg-,Ia-,Thy-1.2-。为检测到病毒颗粒的分泌,XC斑点形成试验阴性。该细胞可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖;可以经抗体依赖分裂绵羊红细胞与肿瘤靶细胞;LPS或PPD处理2天可诱导分裂红细胞,但对肿瘤靶细胞无作用。
| 细胞英文名称 | RAW264.7 | 细胞中文名称 | 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 |
| 形态特性 | 上皮细胞 | 生长特性 | 贴壁生长 |
| 培养体系 | DMEM+10%FBS | ||
| 传代方法 | 1:2传代 | 传代情况 | |
| 冻存条件 | 无血清细胞冻存液 | ||
| 备注 | 悬浮细胞离心收集 | ||
STR:



1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养


小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW264.7收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢,普通的方法根本就不可能将它消化下来,这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得,简介如下:消化液:0.5%胰酶、0.2%EDTA,实验前加温到37度以50ml培养瓶为例:1、细胞贴壁生长,长满瓶底80%时,弃去培养液,加D-HANKS 漂洗 两次;2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1-2ml,消化37℃约2-5min,镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化,弃消化液加D-HANKS 漂洗两次;3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞
单核/巨噬细胞的分化成熟及组织分布 单核/巨噬细胞均来源于骨髓干细胞。发育成单核细胞后,进入血流分布于各种器官组织,并有不同的命名。如图2-12 单核巨噬细胞的组织分布 成熟的单核吞噬细胞表达多种表面分子.其中受体多达数十种,如免疫球蛋白的Fc受体FcyRI(CD64)、FcγRⅡ(CD32)、FcγRⅢ(CDl6),补体受体CRl和CR3和各种模式识别受体(包括甘露糖受体、清道夫受体、TLR),以及多种细胞因子、激素、神经肽、多糖、糖蛋白和脂蛋白的受体(图2―13),介导单核/
・ Lymphocyte Transformation (Donis-Keller lab) Lymphocytes are transformed to establish cell lines. Mononuclear cells (lymphocytes) from anticoagulated venous blood are isolated by layering onto histopaque










