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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详询
- 细胞类型:
小鼠成肌细胞
- 肿瘤类型:
详询
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
C2C12
- 生长状态:
贴壁细胞
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
详询
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
成肌细胞样
- 免疫类型:
详询
- 物种来源:
小鼠
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
肌肉 品系:C3H
- 规格:
1×10⁶cells/T25培养瓶
别称:C2c12; C2-C12; C12
种属:小鼠
年龄(性别):肌肉 品系:C3H
生长特性:贴壁细胞
细胞形态:成肌细胞样
生长培养基:DMEM高糖(PM150210)+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推荐传代比例:1:3-1:4
推荐换液频率:2-3天/次
冻存条件:冻存液:50%基础培养基+40%胎牛血清+10%DMSO
温度:液氮
培养条件 :
气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃
背景描述:C2C12小鼠成肌细胞是由D·Yaffe和O·Saxel建立的小鼠成肌细胞株的亚克隆;C2C12细胞分化很快,形成可伸缩的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(BMP-2)处理C2C12细胞,会导致C2C12细胞的分化途径从成肌细胞转换为成骨细胞。检测表明,C2C12细胞肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。
细胞计数
原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目即可换算出每mL细胞悬液中的细胞数量。
操作步骤:
1.将计数板及盖玻片擦拭干净,并将盖玻片盖在计数板上;
2.轻轻吹打细胞悬液,使细胞均匀分布;吸出少许细胞悬液滴在细胞入口,使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间,静置1-2min,使细胞沉降;注意盖玻片下不要有气泡,也避免细胞悬液进入旁边的槽中;
3.在显微镜下对A/B/C/D四个大格内的细胞进行计数,压在大格四周边线上的细胞只计数压在2条边线上的细胞(如右侧和下方);若镜下有2个细胞组成的细胞团,则应按单个细胞计算;若细胞团数量较多,占细胞总量的10%左右,则说明细胞分散不好会导致计算不准确,需要重新制备细胞悬液;
4.按公式计数细胞数量:细胞数/mL=四个大格内细胞总数×104/4
(每一个大格的体积为长1mm×宽1mm×高0.1mm=0.1mm3,1mL=1000mm3,因此计算时需×104)
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文献和实验1) 细胞消化液的配制及存储:我采用的是0.25%Trypsin+0.05%EDTA的消化液,BUFFER采用的是D-Hank's液。配完后分装成4-5ml/tube,于-20度冰箱中储存。2) 消化前的处理:当细胞生长至亚融和状态需要传代时,提前半小时将配好的消化液放在细胞培养孵箱中预热,同时将配好的高压无菌的D-Hank's液也进行预热。3) 消化细胞:将预热的D-Hank's液洗细胞2次,2ml/25cm2,然后再加入预热的消化液,作用3-5min,并反复振荡,镜下观察。当细胞被消化
地控制细胞分化率。 RAW264.7 细胞三天不传代更容易分化,很难吹下,每一次接种密度都要控制好;培养过程中一般无法保证 100% 不分化,分化的细胞贴壁性比未分化的要强,传代时只要容易吹下的细胞就可;吹打的力度一定要轻,切勿暴力吹打。 图 8:分化的 RAW 264.7 细胞形态 ④C2C12 细胞 C2C12 细胞是小鼠成肌细胞,属于贴壁细胞,分化很快,形成可伸缩的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白 2(BMP-2) 诱导 C2C12 细胞,会导致 C2C12 细胞的分化途径从成肌细胞
章内容充实丰富,小编决定分两次给大家详细解读,本次重点阐述高通量数据分析部分。 一、样本介绍 本文所研究的样本是人和小鼠(C2C12)的肌母细胞(myoblasts ,GM)以及诱导分化后的肌管细胞(myotubes ,DM),每个样本有A,B两个重复进行RNA-Seq(在circRNA进行差异表达分析中,作者还用到了人肌营养不良(DMD)样本)。作者采用FindCirc软件流程检测circRNA,结果如下表: 表1 Number of detected linear and circular
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