BIOTIN-兔抗牛血清白蛋白

胶体金标记物的制备

结合。为防止蛋白质与胶体金的聚合与沉淀，常用牛血清白蛋白，卵白蛋白，聚乙二醇或明胶作稳定剂。用Sephacryb S—400 （丙烯葡聚糖S—400 ）层析分离纯化胶体金蛋白标记物只适用于以BSA作稳定剂者。一、待标记蛋白质的准备（1）透析除盐：蛋白质溶液内应除去多余的电解质，不然过高的盐类物质会降低胶体金颗粒的Zeta电位，影响蛋白质的吸附，因此，标记之前必须彻底除盐。一般将蛋白质置入透析袋中然后直接放入双蒸水或极低浓度的盐水（0.005mol/L NaCl ， pH7.0）透析。（2）去除蛋白质中的

牛副结核ELISA

一、材料与试剂 1、副结核分枝杆菌亲和层析抗原 2、草分枝杆菌吸收抗原 3、兔抗牛IgG酶标抗体 4、牛副结核病参考阳性血清 5、牛副结核病参考阴性血清 1～5项均由指定单位供应。 6、器材 ELISA板， 酶联免疫吸附检测仪、加样器、洗瓶、恒温箱等。 7、试剂及溶液配制同第五节猪瘟ELISA.。 二、操作方法 1、抗原包被 以抗原稀释液将副结核亲和层析抗原稀释至50µg/ml,每孔包被0.1ml.部分对照孔以牛血清白蛋白(50µg/ml)包被。 2、血清处理 取待检血清

单向、双向免疫琼脂扩散和免疫电泳（图）

材料 1%琼脂（生理盐水配制）管，每管约4ml 　　载玻片 　　打孔器及打孔模板 　　微量加样器及塑料吸头 　　抗原：0.5µg/ml牛血清白蛋白（BSA）、0.5µg/ml人血清白蛋白（HSA） 　　抗体：兔抗人血清白蛋白加兔抗牛血清白蛋白 　　湿盒三、实验方法 1．将已溶化的1%盐水琼脂管放58℃～60℃水浴箱中平衡温度备用。 2．将载玻片置于水平桌面上，倾注已溶化琼脂3.5～4ml，使成厚度约1.5mm琼脂板（注意：倾注速度不要过快，以免琼脂溢出载玻片；倾注过程要连续以保证琼脂板均匀、平滑