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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
12个月
- 保存条件:
4℃
- 英文名:
EMSA PAGE Kit
- 库存:
100
- 供应商:
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格:
50T
产品简介:
凝胶迁移实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验(EMSA,electrophoretic mobility shift assay),是一种用于蛋白与核算相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验,也可应用与蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究。
本产品包括EMSA PAGE 凝胶制备所需全套试剂,只需自备蒸馏水,即可制备高质量各种浓度的凝胶,方便、快捷。
| 成品胶厚度 | 0.75mm | 1.0mm | 1.5mm |
| 可制胶数量 | 50片(10*8cm) | 40片(10*8cm) | 25片(10*8cm) |
| 具体可以配制的凝胶数量与凝胶厚薄、大小有关。 | |||
产品构成:
| 编号 | 试剂A | 试剂B | 试剂C | 试剂D |
| 名称 | 30%ACR | 凝胶缓冲液 | 50%甘油 | PAGE胶促凝剂 |
| 规格 | 50ml | 25ml | 15ml | 5ml |
| 保存条件 | 4℃,避光 | 4℃ | 室温 | -20℃ |
保存条件:
注意事项:
使用说明:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE 分离胶配制浓度,凝胶浓度配方参考附表。
| 4%/6ml | 4.5%/6ml | 5%/6ml | 6%/6ml | 6.5%/6ml | |
| 30%ACR | 0.8ml | 0.9ml | 1ml | 1.2ml | 1.3ml |
| 凝胶缓冲液 | 0.6ml | 0.6ml | 0.6ml | 0.6ml | 0.6ml |
| 50%甘油 | 0.3ml | 0.3ml | 0.3ml | 0.3ml | 0.3ml |
| ddH2O | 4.3ml | 4.2ml | 4.1ml | 3.9ml | 3.8ml |
| PAGE胶促凝剂 | 30μl | 30μl | 30μl | 30μl | 30μl |
1 配制凝胶
2 电泳
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文献和实验还是两端都标记,这样才能更好的提高灵敏度, 国内的标记技术我还不是很了解,我们这边的探真都是国外定做的,还算可以,其制作程序如下: 合成寡核苷酸---标记生物素---纯化---退火合成双链.也是一个比较复杂的过程. 4. EMSA实验技术: 这一点主要是操作的细节问题! 下面会更细的谈到. 技术要点: 关于技术要点,我在这里只提一下关键的几点需要注意的细节操作,其他的照正常程序就可以了! 1. 制胶 必须是非变性PAGE凝胶,我们实验
luozhifeng339 请教各位达达,我准备做EMSA,如果做SUPER-SHIFT的话,该选择原装抗体还是分装的抗体呢,盼不吝赐教! wanglinling 看到一篇EMSA的文章,不知道里面有没有回答你的问题哈,不过英文的值得阅读哈。 GEL SUPER-SHIFT ASSAY/ EMSA Materials/Reagents: See Gel-shift assay Procedure
改善EMSA的电泳结果。如需纯化,可以按照如 下步骤操作:(1) 对于100微升标记好的探针,加入1/4体积即25微升的5M醋酸铵,再加入2体积即200微升的无水乙醇,混匀。(2) 在-70℃至-80℃沉淀1小时,或在-20℃沉淀过夜。(3) 在4℃,12, 000g-16, 000g离心30分钟。小心去除上清,切不可触及沉。(4) 在4℃,12, 000g-16, 000g离心1分钟。小心吸去残余液体。微晾干沉淀,但不宜过分干燥。(5) 加入100微升TE,完全溶解沉淀。标记好的探针最好立即使用









