Tricine-SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

Tricine-SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

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  • ¥220
  • 万生昊天/WSHT
  • 上海
  • EZWB16-5
  • 2025年12月17日
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    • 详细信息
    • 询价记录
    • 技术资料
    • 保质期

      12个月

    • 保存条件

      4℃

    • 英文名

      Tricine-SDS-PAGE Kit

    • 库存

      100

    • 供应商

      上海万生昊天生物技术有限公司

    • 规格

      50T

    产品简介:
    常规的Tris-SDS-PAGE电泳的只能分辨大分子蛋白,对于相对分子量小的,尤其是10 kD 以下的蛋白分辨率极低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分离分子量在1-10 kD的蛋白及多肽,成为目前电泳法变性分离多肽的主要方法。
    本产品包括Tricine-SDS- PAGE 凝胶制备所需全套试剂,只需自备蒸馏水,即可制备高质量各种浓度的凝胶,方便、快捷,电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
     
    成品胶厚度 0.75mm 1.0mm 1.5mm
    可制胶数量 50片(10*8cm) 40片(10*8cm) 25片(10*8cm)
    具体可以配制的凝胶数量凝胶厚薄大小有关。

    产品构成:
    编号 试剂A 试剂B 试剂C 试剂D
    名称 49.5%Acr  凝胶缓冲液 50%甘油 PAGE胶促凝剂
    规格 60ml 100ml 60ml 5ml
    保存条件 4℃,避光 4 室温 -20℃

    保存条件:
    1.配胶试剂盒 4ºC避光保存,三个月有效;
    2.促凝剂可置于4℃保存三个月

    注意事项:
    1. PAGE胶促凝剂的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验调整。
    2. 在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。
    3. 在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作,加水时速度不能快。
    4. Acr/Bis具有神经毒性,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
    5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
    6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    使用说明:
    根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE 分离胶配制浓度,凝胶浓度配方参考附表。
      分离胶 夹层胶 浓缩胶
      16.5%/4.5ml 15%/4.5ml 10%/1.8ml 4%/2ml
    49.5%Acr 1.50ml 1.36ml 0.36ml 0.16ml
    凝胶缓冲液 1.50ml 1.50ml 0.60ml 0.50ml
    50%甘油 1.50ml 1.50ml 0.60ml /
    ddH2O / 0.14ml 0.24ml 1.34ml
    PAGE胶促凝剂 45μl 45μl 18μ| 20μ|

    1 配制分离胶
    1.1 将不同体积的双蒸水、49.5%Acr 、凝胶缓冲液和50%甘油加入到离心管中混合
    1.2 加入PAGE胶促凝剂,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀
    1.3 在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 mm的水层,使凝胶表面保持平整
    1.4 静置,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。

    2 配制夹层胶去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去
    2.1 将不同体积的双蒸水、49.5%Acr和凝胶缓冲液加入到离心管中混合
    2.2 加入PAGE胶促凝剂,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀
    2.3 将适量的夹层胶溶液迅速加至分离胶的上面(对于1 mm的mini-gel,夹层胶溶液加约1 ml) 然后在夹层胶溶液上轻轻覆盖一层水层,使凝胶表面保持平整
    2.4 静置,待夹层胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。

    3 配制浓缩胶去除覆盖在夹层胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去
    3.1 将不同体积的双蒸水、49.5%Acr 和凝胶缓冲液加入到离心管中混合
    3.2 加入PAGE胶促凝剂,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀
    3.3 将梳子插入凝胶内,避免产生气泡
    3.4 待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔
    3.5 进行电泳操作。

    4 电泳
    4.1 将电泳槽放入4℃或冰水浴中
    4.2 外槽加入阳极缓冲液,内槽加入阴极缓冲液
    4.3 30V 预电泳10min
    4.4 将样品(已经过Tricine专用上样缓冲液处理)加入点样孔后30V 电泳1小时
    4.5 100V电泳至溴酚蓝到达胶底部后停止电泳
    4.6 进行后续的考马斯亮蓝染色或电转。

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