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- 详细信息
- 询价记录
- 技术资料
- 保质期:
12个月
- 保存条件:
4℃
- 英文名:
Tricine-SDS-PAGE Kit
- 库存:
100
- 供应商:
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格:
50T
产品简介:
常规的Tris-SDS-PAGE电泳的只能分辨大分子蛋白,对于相对分子量小的,尤其是10 kD 以下的蛋白分辨率极低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分离分子量在1-10 kD的蛋白及多肽,成为目前电泳法变性分离多肽的主要方法。
本产品包括Tricine-SDS- PAGE 凝胶制备所需全套试剂,只需自备蒸馏水,即可制备高质量各种浓度的凝胶,方便、快捷,电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
产品构成:
保存条件:
注意事项:
使用说明:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE 分离胶配制浓度,凝胶浓度配方参考附表。
1 配制分离胶
2 配制夹层胶(去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去)
3 配制浓缩胶(去除覆盖在夹层胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去)
4 电泳
常规的Tris-SDS-PAGE电泳的只能分辨大分子蛋白,对于相对分子量小的,尤其是10 kD 以下的蛋白分辨率极低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分离分子量在1-10 kD的蛋白及多肽,成为目前电泳法变性分离多肽的主要方法。
本产品包括Tricine-SDS- PAGE 凝胶制备所需全套试剂,只需自备蒸馏水,即可制备高质量各种浓度的凝胶,方便、快捷,电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
| 成品胶厚度 | 0.75mm | 1.0mm | 1.5mm |
| 可制胶数量 | 50片(10*8cm) | 40片(10*8cm) | 25片(10*8cm) |
| 具体可以配制的凝胶数量与凝胶厚薄、大小有关。 | |||
产品构成:
| 编号 | 试剂A | 试剂B | 试剂C | 试剂D |
| 名称 | 49.5%Acr | 凝胶缓冲液 | 50%甘油 | PAGE胶促凝剂 |
| 规格 | 60ml | 100ml | 60ml | 5ml |
| 保存条件 | 4℃,避光 | 4℃ | 室温 | -20℃ |
保存条件:
1.配胶试剂盒 4ºC避光保存,三个月有效;
2.促凝剂可置于4℃保存三个月。
注意事项:
1. PAGE胶促凝剂的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验调整。
2. 在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。
3. 在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作,加水时速度不能过快。
4. Acr/Bis具有神经毒性,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE 分离胶配制浓度,凝胶浓度配方参考附表。
| 分离胶 | 夹层胶 | 浓缩胶 | ||
| 16.5%/4.5ml | 15%/4.5ml | 10%/1.8ml | 4%/2ml | |
| 49.5%Acr | 1.50ml | 1.36ml | 0.36ml | 0.16ml |
| 凝胶缓冲液 | 1.50ml | 1.50ml | 0.60ml | 0.50ml |
| 50%甘油 | 1.50ml | 1.50ml | 0.60ml | / |
| ddH2O | / | 0.14ml | 0.24ml | 1.34ml |
| PAGE胶促凝剂 | 45μl | 45μl | 18μ| | 20μ| |
1 配制分离胶
1.1 将不同体积的双蒸水、49.5%Acr 、凝胶缓冲液和50%甘油加入到离心管中混合;
1.2 加入PAGE胶促凝剂,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀;
1.3 在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 mm的水层,使凝胶表面保持平整;
1.4 静置,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
2 配制夹层胶(去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去)
2.1 将不同体积的双蒸水、49.5%Acr和凝胶缓冲液加入到离心管中混合;
2.2 加入PAGE胶促凝剂,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀;
2.3 将适量的夹层胶溶液迅速加至分离胶的上面(对于1 mm的mini-gel,夹层胶溶液加约1 ml), 然后在夹层胶溶液上轻轻覆盖一层水层,使凝胶表面保持平整;
2.4 静置,待夹层胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
3 配制浓缩胶(去除覆盖在夹层胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去)
3.1 将不同体积的双蒸水、49.5%Acr 和凝胶缓冲液加入到离心管中混合;
3.2 加入PAGE胶促凝剂,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀;
3.3 将梳子插入凝胶内,避免产生气泡;
3.4 待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔;
3.5 进行电泳操作。
4 电泳
4.1 将电泳槽放入4℃或冰水浴中;
4.2 外槽加入阳极缓冲液,内槽加入阴极缓冲液;
4.3 30V 预电泳10min;
4.4 将样品(已经过Tricine专用上样缓冲液处理)加入点样孔后30V 电泳1小时;
4.5 100V电泳至溴酚蓝到达胶底部后停止电泳;
4.6 进行后续的考马斯亮蓝染色或电转。
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Tricine-SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
¥220









