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- 信帆生物
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- xf20195366
- 2025年07月13日
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- 文献和实验
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信帆生物
简单介绍:受精卵的培养
注意事项:无菌溶液。经过滤除菌处理。
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文献和实验，先将 CFSE 染色和不染色的细胞 2 倍稀释，每孔 100 μl 细胞铺板。将 ConA 储存液进行 100 倍稀释，在 ConA 组中每孔加入 100 μl 配置好的 ConA 工作液，使得终浓度为 5 μg/ml（这时就是 200 倍稀释啦），在 PBS 组中加入 100 μl 完全培养基（这样铺板密度就为 5×105/ 孔）。将细胞培养板置于 37 ℃，5% CO2 的培养箱中培养 72 小时。4. 流式上机检测收集各组细胞，染色组细胞进行 CD3 表面染色，以对脾细胞中的淋巴细胞的增殖
2-8 μg 为佳）加入240 μL HBS中，混匀。另一管中则用HBS 将100 μM 的PEI 储存液稀释成10 μM，充分混合。然后取180 μL 10 μM PEI 溶液加入含有DNA 的HBS 中，充分混匀后室温静置20-30 min。最后将这420 μL 的PEI-DNA 混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中，轻轻摇动平皿混匀，置于含5％～7％ CO2 的37℃ 温箱孵育。 注：每次用100 μM 的PEI 储存液前都需要先将其充分混匀，保证所取的浓度一致。 3. 培养6-10 h
【材料与试剂】 Hoechst 33342储存液（0.1mg/ml）：配制方法同上述。 PI储存液（1mg/ml）：配制方法同上述。 PBS 培养细胞或离体细胞制成的单细胞悬液。 【操作方法】 将106 个细胞悬浮于1ml培养基（含10%小牛血清）中，加入10μl Hoechst33342储存液，混匀； 置于37℃温育5～15min； 将细胞置于冰上冷却后，于4℃离心，去除上清； 将细胞重新悬浮于1ml
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