BBT缓冲液（pH8.6）

手把手教你做好体外 DNA 重组

】1. 消化缓冲液：100 mM NaCl，10 mM Tris.Cl (pH8.0)　25 mM EDTA (pH8.0)，0.5% (w/v) SDS，0.1 mg/mL 蛋白酶 K。2. 7.5mol/L 乙酸铵。3. 100% 乙醇。4. 酚/氯仿/异戊醇。【实验方法与步骤】1. 将新鲜组织剪成小块并立即置于液氮中冻存；2. 将 200 mg～1 g 的组织用预冷的研钵研碎，或用锤子将其捣为细粉末，每 100 mg 组织用 1.2 mL 消化缓冲液悬浮，然后于 50℃ 摇荡温育 12~18 h

【建议】关于如何提蛋白质纯化问题（附例）

条带说明，从左到右，或1234567..... 2、建议把流程中的各个部分所用缓冲液说明一下，例如： 破菌缓冲液:如pH8.0，20mMTris，0.5N NaCl 破菌方法：如超声，4s工作，4s间隙，冰水浴，共200次 包涵体洗涤液：如PBS（pH7.4，20mM PB，0.15N NaCl） 包涵体溶解液：如pH8.0，20mMTris，0.5N NaCl，8M尿素 柱平衡液：如pH8.0，20mMTris，0.5N NaCl，8M尿素，20mM 咪唑 柱淋洗液：如pH8

免疫沉淀反应（三）——对流免疫电泳实验

缓冲液中进行电泳，它带有负电荷，而与琼脂相接触的水溶液就带正电荷，这样的液体便向负极移动。抗体分子就是随着带正电荷的液体向负极移动的。而一般的蛋白质（如血清抗原）也受电渗作用的影响，使泳动速度减慢，但它的电泳迁移率远远大于电渗作用。这样抗原体就达到了定向对流，在两者相遇且比例合适时便形成肉眼可见的沉淀线。一、材料 1. 诊断血清：免抗人免疫血清 2. 待检血清：人血清 3. 阴性对照血清 4. pH8.6、离子强度0.05 M 巴比妥缓冲液配方：巴比妥1.84 g，巴比