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—20℃,6个月
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100
- 供应商:
信帆生物
产品名称:HEPES-CHAPS缓冲液(pH7.5)
简单介绍:Caspase活性的酶促分析
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文献和实验的buffer A分别稀释水相与去污相,并进行免疫沉淀实验 试剂: 1)2%tritonX114:2%TritonX114、50mmol/L Tris HCl(pH7。5)、蛋白酶抑制剂 2)缓冲液A(含0。5mol/LNaCl的RIPA buffer) 3)buffer C 10mmol/L Tris HCl(pH7.5) 150mmol/L NaCl 5mmol/L EDTA(PH7.5) 分离细胞膜蛋白的方法: 7M urea 2M thiourea 4%chaps
一、细胞裂解的准备 (1)1×107 细胞重悬, 其来源可为新鲜样品或贮存于- 80℃ 1mo l 冰冻清洗缓冲液中 的无DM SO 的样品, 冰冻缓冲液包括10mM HEPES (pH7. 5), 1. 5mM M gCl2, 10mM KCl, 1mM 二硫苏糖醇(DTT ) , 然后离心(16 000rpm、4℃、1m in)。 (2)重悬细胞团于100ul 冰冻裂解缓冲液, 其包含10mM T ris-HCl (pH7. 5) , 1mM MgCl2, 1mM EGTA
/每管可供应用 不需另配!!! 细胞裂解液配方: 6M Urea(60. 06) 1.8018 g 2M thiourea(76.12) 0. 7613 g 65mM DTT 0.050 g 4% CHAPS 0.2 g 40Mm Trisbase 0.02425 g 共5ml分装成200µl/每管(可应用于50-100ml培养瓶内的细胞裂解) 1、溶液准备 2×样品缓冲液:130mM
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