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- 80107H L
- 2025年07月15日
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上海希言科学仪器有限公司
T4 DNA连接酶
DNA连接酶在辅助因子ATP的作用下，可催化双链DNA或RNA上的5'-磷酸末端和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键，可用于催化平末端或黏性末端之间的连接反应，也可修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。在DNA片段与载体、Linker或Adaptor DNA的连接中具有广泛应用。
本产品提供了常规浓度和高浓度酶的规格，以满足不同使用者的实验需要。
| 产品名称 | 编号 | 规格 | 包装 | 单价 | 加入购物车 |
|---|---|---|---|---|---|
| T4 DNA Ligase | 80107S | 20000U, 400U/μL | ¥398.00 |  |
|
| T4 DNA Ligase | 80107L | 100000U, 400U/μL | ¥1698.00 | |
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| T4 DNA Ligase(高浓度) | 80107H S | 100000U, 2000U/μL | ¥1698.00 | |
|
| T4 DNA Ligase(高浓度) | 80107H L | 500000U, 2000U/μL | ¥5998.00 | |
- 产品介绍
- 说明书
- 技术问答
- 技术视频
1、活性单位定义:在20μl 1×T4 DNA连接酶反应缓冲液中，6μg λDNA/Hind III的酶切产物在16℃下反应30分钟，50%的DNA片段被连接所需的酶量定义为1个活性单位。
2、保存液: 10mM Tris-HCl (pH 7.4)，50mM KCl，0.1mM EDTA，1mM DTT，50% Glycerol.
3、贮存条件: -20℃.
4、反应液（10×）: 500mM Tris-HCl(pH7.5)，100mM MgCl2，100mM DTT，10mM ATP.
5、失活或抑制:在65℃条件下加热10分钟可使该酶失活。
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文献和实验成的，在此反应过程中，已含有经放射性标记的dATP。第二步过程中，脱氧三磷酸核苷酸浓度提高，并且加入双脱氧的三磷酸核苷酸，DNA 在合成过程中，因加入的双脱氧三磷酸核苷酸而随机终止，形成长短不一的DNA片段。二、材料待测的DNA模板，可用双链或单链模板。三、设备高压电泳仪，测序用电泳槽，照相显影用大号塑料盆，制胶设备，吹风机，放射自显影盒，X光片。四、试剂1、5×T7 DNA聚合酶缓冲液：200mmol/L Tris·Cl，pH7.5，100mmol/L MgCl2，250mmol/L NaCl。2、引物
mRNA Amplification with T7 RNA Polymerase
on a 42ºC oven and set PCR machine to hold at 70ºC. In an Eppendorf tube add: 1 µg Total RNA 1 µL T7 oligo(dT) primer q.s. to 12 µL with Nuclease-free H2 O Incubate 10 min. at 70ºC. Spin briefly to pull
14000g×30min，取上清液，0.45μm膜抽滤后作为样品液。3. 将结合T7·Tag抗体的琼脂充分悬起，平衡至室温，装入层析柱中。4. B/W缓冲液平衡后样品液过柱。5. 10ml B/W缓冲液过柱，洗去未结合蛋白。6. 用5ml洗脱缓冲液过柱，每次1ml,洗脱液用含150μl中和缓冲液的离心管收集，混匀后置于冰上，直接SDS-PAGE分析。7. 将洗脱下来的蛋白放入透析袋中，双蒸水透析24hr,中间换液数次。8. 用PEG 20000浓缩蛋白。（三）注意事项蛋白在过层析柱前，要0.45μm膜
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