相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 保质期:
24个月
- 供应商:
雅吉生物
- 保存条件:
2~8°
【产品名称】:病毒DNA/RNA核酸提取试剂盒
【包装规格】: 50T/盒
【预期用途】
本产品适合于从血清、血浆、牛奶、体液、培养液、组织匀浆液、拭子等样品中提取病毒RNA或DNA。试剂盒基于硅胶柱纯化技术,提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提,也无需进行耗时的醇类沉淀。获得的DNA/RNA可直接用于RT-PCR、PCR、Northern杂交、以及各种病毒检测等。
病毒DNA/RNA核酸提取试剂盒【主要组成成份】
| 组成 | 50T/盒 |
| 纯化柱 | 50个 |
| 2ml 收集管 | 50个 |
| 蛋白酶K(B盒) | 1.2ml |
| 裂解液(Buffer AL) | 20 ml |
| 洗涤液(Buffer RW) | 100 ml |
| Nuclease Free Water | 10 ml |
本产品部分组份(不含蛋白酶K)保存于室温(15-25℃),有效期12个月,长期保存时需置于2-8℃;蛋白酶K保存于-20℃,有效期12个月。
【注意事项】
- 自备无水乙醇(96-100%)、自备离心管;
- 为避免其他核酸的污染,必须使用不含DNA和RNA的离心管、吸管、枪头、试剂和手套,操作人员须戴口罩;
- 避免反复冻融蛋白酶 K,会影响其活性。
- 转移20 µl 蛋白酶K至1.5ml离心管中。
- 转移200 µl样品,如血清、血浆、尿液、培养液上清、或其它无细胞体液至装有蛋白酶K的离心管中,震荡混匀5s。若样品不足200µl,用Buffer PBS或无核酶水补足。(咽/口腔拭子,或固体组织样品先用Buffer PBS浸泡或匀浆后,离心取上清进行操作。)
- 加入200µl 裂解液 至步骤2的混合液中,涡旋混匀15s,室温静置10min。
- 加入250µl无水乙醇 至步骤3的混合液中,涡旋混匀15s,室温静置3min。
- 把 纯化柱 装在2ml收集管中,转移步骤4的混合液至纯化柱中。12,000rpm离心1min。
- 倒弃滤液把纯化柱装回收集管中,加入650 µl 洗涤液 至纯化柱中,12,000rpm离心1min。
- 按照步骤6重复一次。
- 倒弃滤液把纯化柱套回收集管,12,000rpm离心空柱2min甩干纯化柱。
- 将纯化柱转移至新的1.5ml离心管,加入50µl Nuclease Free Water至纯化柱的膜中央,室温静置1min,12,000rpm离心1min。离心管中即为所提取的样品DNA/RNA。
- 纯化柱堵塞
- 样品用量太多:处理动物抗凝血液时,样品量控制在100-150µl。尽量使用无细胞的样品,如血浆、血清、组织匀浆液的上清等。
- 蛋白酶 K活性下降:重新制备蛋白酶 K。使用后蛋白酶 K必须保存于-20℃,避免反复冻融。蛋白酶 K与裂解液不能预先混合。
- 样品含固体颗粒:在第4步加入乙醇前,12,000rpm离心3min去除未消化的杂质,转移上清液至新的离心管后再加入乙醇。
- 样品裂解不充分:样品与裂解液混匀不充分。重新提取,加入裂解液后先颠倒混匀3-5次,然后以最高速度涡旋让样品与裂解液充分混匀。
- 下游应用结果不理想
- 样品被反复解冻: 避免反复冻溶样品。推荐使用新鲜样品或只解冻过一次的样品。
- 蛋白酶K活性下降:更换蛋白酶K。使用后蛋白酶 K必须立即保存于-20℃,避免反复冻融。
- Nuclease Free Water被污染:更换新的Nuclease Free Water或DEPC处理水。
- 乙醇残留:柱子在洗脱前,需要空甩去除乙醇。对于敏感的应用,柱子在洗脱后,打开柱子的盖子,放置10-15min让乙醇彻底挥发。
- 洗脱效率:处理富含DNA的样品时,把Nuclease Free Water预热至55℃后再进行洗脱,有利于提高DNA得率。
- 病毒DNA/RNA核酸提取试剂盒
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验。 同样基于 MACS Technology 的 μMACS SuperAmp 试剂盒利用偶联了 poly-A 尾的 50 nm 超顺磁微珠准确高效捕获 mRNA 的同时,柱内 cDNA 合成保证了无原材料流失,进一步提高了反应的灵敏度和 RNA 分析的精确度,1 到 104 个细胞的转录组分析都可实现。 上图分别为核酸提取(左图) 和 cDNA 合成(右图)的基本原理 极少量细胞的核酸提取及逆转录仅在 3 个小时内即可完成,并带来如下优势: ✦超高灵敏度,所需细胞数量可少至 1 个,所需
中是否含有逆转录/扩增抑制剂(图 2)。 表 1:阳性内对照和相关试剂盒 图 2:通过 IPC 提示体系中抑制剂的存在。实验结果为同样浓度的 RNA 加入相同拷贝 Xeno IPC,在不同浓度的扩增抑制剂血红素存在下(0-4μM),Xeno IPC 的 Ct 值与目标 RNA 的 Ct 值定量结果。 阳性样本对照 Positive Sample Control 阳性内对照虽然可以在一定程度上反应核酸提取效率,但是却很难反馈提取流程中对核酸释放的效率。一些病原体的样本,尤其是含有革兰
。一项对比固定时间的实验表明 72 h固定对 RNA 完整性的影响不大,但可能交联严重影响大片段的扩增。 与 RNAlater 及 20 h 固定相比,72 h 固定后,较大片段(红色)扩增失败概率更大 取材 取材是标本处理的第一步,由于下一步操作使用脱水机的程序是一定的,因此规范取材是获得优良切片的前提,取材不规范,厚薄不均,往往会造成组织固定、脱水、透明、浸蜡不佳。 组织块大小以 1.5 cm x 2.0 cm x 0.2-0.3 cm 为宜,组织的大小与厚薄不要把一次性包埋盒的空间












