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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
225
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
- 规格:
250T|1000T
特别提示:包括Lowry蛋白定量试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:Lowry蛋白定量试剂盒
产品货号:HR0334
产品规格:250T|1000T
在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物,Folin-酚试剂中的磷钼酸盐-磷钨酸盐被复合物蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深蓝色,在一定的条件下,蓝色深度与蛋白的量成正比,可根据750nm的光吸收值大小计算蛋白质的含量。
储存条件:试剂A、B和Folin-Ciocalteu试剂4℃保存。蛋白标准-20℃保存。
有效期:一年。
使用方法:
A、96孔酶标板测定:
1.工作液C配制。根据样品数量,按50体积试剂A加1体积试剂B(50:1)配制适量工作液C,充分混匀。
2.标准曲线绘制。
3.加入Folin-Ciocalteu试剂振荡混匀后,室温放置30分钟。
4.用酶标仪测定A750,以不含BSA的光吸收值为空白对照。
5.以蛋白含量(μg)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。
6.样品测定:将待测蛋白样品用去离子水稀释至适当浓度,取20μl样品,加入200μl 工作液C,混匀后室温放置10分钟,然后加入20μl Folin-Ciocalteu试剂,混匀后室温放置30分钟。
7.以 0 号孔为对照,测定样品吸收值A750。
8.根据测得的吸收值,在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。
9.计算蛋白浓度:以查得的蛋白含量除以样品体积20μl,再乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。
B.比色皿测定
按照比色皿规格,与以上方法相同,适当按比例增加各溶液体积即可。
注意事项:
1.在低温条件或长期保存出现沉淀时,可搅拌或37℃温育使溶解,如发现细菌污染则应丢弃。
2.许多干扰物质会降低颜色反应。
3.使用孵育时,应注意防止因水份蒸发影响检测结果。
我公司销售的Lowry蛋白定量试剂盒质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验的混合物)。在一定的条件下,兰色深度与蛋白的量成正比。 Folin―酚试剂法最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。这个测定法的优点是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多,缺点是费时间较长,要精确控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子,同样容易干扰Lowry反应。而且对后者的影响还要大得多。酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。浓度较低的尿素(0.5%),硫酸纳
色深度与蛋白的量成正比。Folin—酚试剂法最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。这个测定法的优点是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多,缺点是费时间较长,要精确控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子,同样容易干扰Lowry反应。而且对后者的影响还要大得多。酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。浓度较低的尿素(0.5%),硫酸纳(1%),硝酸纳(1%),三氯
[目的] 掌握Lowry法测定蛋白质浓度的原理。 [原理] 蛋白质在碱性溶液中其肽键与Cu 2+ 螯合,形成蛋白质一铜复合物,此复合物使酚 试剂 的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,在一定条件下,利用蓝色深浅与蛋白质浓度的线性关系作标准曲线并测定样品中蛋白质的浓度。 [操作] 取试管7支、编号、按下表操作
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