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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
209
- 英文名:
Heparin
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
- 规格:
5ml/100ml/1000ml
特别提示:包括肝素琼脂糖磁珠在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:肝素琼脂糖磁珠
英文名称:Heparin
产品货号:CZ009
产品规格:5ml/100ml/1000ml
产品简介:
Heparin磁珠具有快速的磁响应性、丰富的肝素密度、极高的物理化学稳定性等特点。一方面,可作为亲和层析的配基,能够与生长因子及抗凝血酶AT Ⅲ等生物分子发生特异性结合;另一方面,由于表面带有大量负电性硫酸根离子基团,可作为一种阳离子交换介质,在一定pH条件下,与带正电的蛋白具有强的结合能力。
与传统柱层析纯化方式相比,Heparin磁珠无需对粗蛋白样品进行预处理(如:反复繁琐的离心,费时费力的过滤操作),此外,无需控制流速及柱压,不需要昂贵的层析设备。对于熟练的操作者来说,在很短时间内就能完成高纯度目的蛋白的提取,且能轻松实现多个样品的平行处理,实现高通量的蛋白纯化。
适用于抗凝血因子III、凝血因子、核酸结合蛋白、脂蛋白、干扰素、类固醇受体、凝血酶及类凝血酶等生物大分子的分离纯化。
保质期:2~8℃可稳定保存,保质期2年
注:1. 蛋白结合量与目标蛋白特性相关,此处仅作参考值;
2. 1 mL磁珠悬液中含有100 μL磁珠。
产品优势:
1. 丰富的结合位点,加强了与配体的特异性结合
2. 磁响应速度快,减少操作时间
3. 磁珠具有良好的分散性和重悬性,提高操作的便捷性
4. 配基具有良好的物理化学稳定性,提高了实验结果的可靠性及可重复性
操作流程(以纯化人血浆中抗凝血酶 Ⅲ为例):
1. 样品处理:取人血浆1 mL加入至1.5 mL EP管中,接着加入500 μL Binding Buffer,充分混匀。
2. 磁珠预处理:将Heparin磁珠漩涡振荡30 s,使磁珠充分重悬;取1 mL 10%(v/v)磁珠悬液置于另一新的1.5 mL EP管中。对磁珠悬液进行磁性分离,弃上清液,用1 mL Binding Buffer洗涤2次,磁性分离,管中磁珠可直接用于抗体分离。
3. 蛋白吸附:在步骤2预处理的磁珠管中加入步骤1处理的样品溶液,漩涡振荡均匀,在室温下(约25℃)将EP管置于垂直混合仪混匀15~30 min,使样品和磁珠充分接触并吸附,然后进行磁性分离,移弃上清液。
4. 磁珠洗涤:向EP管中加入1 mL Binding Buffer,漩涡振荡重悬磁珠1 min后进行磁性分离,移弃上清液;该操作重复3次。
注意事项:根据对洗脱蛋白SDS-PAGE图谱,在Binding Buffer中可适当加入一定浓度NaCl,该步骤可有效的去除非特异性吸附蛋白,使操作者获得更高浓度的目标蛋白。
5. 蛋白洗脱:在上述完成磁珠洗涤的EP管中加入0.2 mL Elution Buffer,用移液器吹打或者涡旋振荡下迅速重悬,然后在室温下(约25℃)将EP管置于垂直混合仪混匀10~15 min后进行磁性分离,收集 上清液至新的EP管。
6. 磁珠再生:向EP管中加入1 mL纯化水,漩涡振荡重悬磁珠后进行磁性分离,移弃上清液,重复操作3次;接着改用Binding Buffer洗涤磁珠3次。磁珠多次使用后会有沉淀蛋白、强疏水性蛋白、脂蛋白等杂质非特异性吸附到磁珠上,为了保证磁珠的使用效率,建议进行在位清洗(CIP)。
7. 在位清洗(CIP):依次采用0.1 M NaOH、8 M 尿素、纯化水、Binding Bufdfer洗涤磁珠2次;zuì后加入1 mL Storage Buffer(20%乙醇)重悬磁珠 ,置于2~8℃保存。
注意事项:
1. 本产品不宜冷冻、干燥或离心操作。冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚,不易于重悬和分散,并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。
2. 在使用本产品前,请务必充分振荡或超声使磁珠保持均匀的悬浮状态。
3. 使用过程中可根据需求,用纯化水或缓冲液磁吸洗涤磁珠 2~3次,以去除保存液中乙醇。
4. 本产品需与磁性分离设备配套使用。
5. 盐浓度与pH值均会影响特异性蛋白的结合与洗脱,客户需自行摸索不同蛋白的结合和洗脱条件,以保证 蛋白纯化量和纯度。
6. 本产品仅供研究使用。
我公司销售的肝素琼脂糖磁珠,Heparin质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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肝素琼脂糖磁珠北京现货
¥380 - 3800









