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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Immobilon Western HRP 底物,2 x 50 mL
- 供应商:
上海研卉生物
- 库存:
大量
- 保质期:
1年
- 规格:
2 x 50 mL
主要应用
WB
产品目录编号 WBKLS0100
商名
Immobilon
描述 Immobilon Western HRP 底物,2 x 50 mL
检测方法 Chemiluminescence
格式 HRP
应用
应用 Western blotting, dot/slot blotting
主要应用
Western Blotting
应用说明 For use on immunoblots.
尺寸
膜覆盖范围 1000 cm²
体积 Luminol (50 mL)
Peroxide solution (50 mL)
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文献和实验蛋白质免疫印迹(Western Blot )-底物化学发光 ECL 法
蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以:(1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质;(2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况;(3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA 相互作用后续分析。实验方法原理———底物化学发光 ECL 法Western 免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。与 Southern 或 Northern 杂交
性的保护提高至90%。 (一) 酶制剂及其底物 凡无毒性又能呈现有色化学反应的酶,原则上均可作为标记用。但作为标记抗体用的酶应满足下列要求:(1)来源方便,易于纯化;(2)比活性高,性质稳定;(3)酶活性和量能用简单方法测定。目前在免疫 酶技术中常用的酶为辣根过氧化物酶(HRP)和硷性磷酸酶(AP),其次还有葡萄糖氧化酶,β-半乳糖苷酶、溶菌酶和苹果酸脱氢酶等。 由于辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)比活性高,稳定,分子
同时存在的情况下发光,因此特别适合在同一膜上对不同的靶蛋白进行多重检测。目前最高检测灵敏度已达到Femto水平,已成为最安全、最灵敏的WB检测方法。在许多研究者的心目中,ECL几乎已经成为化学发光的代名词,一般含有Luminol、H2O2和发光增强剂等物质。发光试剂中的Luminol被HRP和H2O2氧化产生荧光,荧光被发光增强剂增强。 化学发光常见的问题是抗体的浓度过高,所以抗体的量要比规定的稀释量加大,以保证底物不会因为HRP过量而过快用完,导致结果不稳定。










