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67-68-5
产品名称:(Sigma-D2650二甲基亚砜(细胞培养级)|DMSO|Dimethyl Slfoxide|CAS:67-68-5)
货号:[Sigma-D2650]
CAS号:{67-68-5}
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sigma-aldrich是全球最大的化工试剂生产商,Sigma-Aldrich是一个生物/化学试剂领先的高科技企业。
Supelco和Fluka是美国Sigma-Aldrich公司旗下的两大著名品牌,致力于分析化学领域的产品研制开发,生产销售和技术服务等。
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文献和实验培养基的离心管中,约1000rpm离心3-5min,弃上清去除DMSO。 4.【重悬】加入1-2mL完全培养基轻轻重悬(悬浮细胞吹打轻柔即可,无需机械辅助),接种至T25培养瓶,标注名称、代次、日期。悬浮细胞接种后呈均匀悬液,瓶底无贴壁为正常。 5.【培养】放入37℃、5%CO₂培养箱静置培养,T25瓶瓶盖拧松或使用透气盖以保证气体交换。 注意:悬浮细胞复苏当天不做离心换液,次日再全量换液去除死细胞与DMSO残留;复苏后24-48h内密度可能偏低,属正常,按密度窗口维持即可。 二、细胞传代 1.【实验
使用≤P10代内细胞,高代次易出现老化(体积增大、增殖变慢)。 三、细胞冻存 1.【准备工作】冻存液:无血清细胞冻存液(abs9417-100mL)或90% FBS(abs972-500mL/SV30302.03)+10% DMSO(abs9187-100mL),现用现配;冻存管标注名称、代次、冻存人、日期;安全柜紫外照射30min。 2.【细胞收集】融合度80%时按传代步骤消化收集,300×g离心后弃上清。 3.【细胞重悬】加入冻存液(约1mL/管)轻柔吹打重悬,细胞密度约1-5×10⁶/mL
消化;收集后轻柔重悬,吹打产生气泡会损伤细胞;Ramos 增殖快,每2-3天传代,维持对数期密度。 三、细胞冻存 1.【准备工作】冻存液:无血清细胞冻存液(abs9417-100mL)或90% FBS(货号:abs972-500mL/SV30302.03)+10% DMSO(abs9187-100mL);冻存管标注信息;安全柜紫外30min。 2.【细胞收集】取对数期细胞,300×g离心5-10min,弃上清。 3.【细胞重悬】加入冻存液(约1mL/管)轻柔重悬,细胞密度约2-5×10⁶个/mL
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