
DNA甲基化定量试剂盒(A-P-1035)
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- EPI
- A-P-1035-48
- 美国
- 2025年07月14日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
1年
- 保存条件:
低温
- 英文名:
MethylFlash Methylated DNA Quantification Kit (Fluorometric)
- 供应商:
A&D Technology
- 库存:
5盒
- 规格:
48次
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文献和实验LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一,它可以在转录水平抑制基因的表达。具体的过程是在胞嘧啶-鸟嘧啶(CpG二核苷酸)的5位碳原子上添加了一个额外的甲基团,形成5-甲基胞嘧啶。CpG二核苷酸密度较高的区域在人体基因组中呈非随机分布于,优先分布于基因的启动子区,并被称为CpG岛[1] 。对于癌症,其基因组的甲基化分布发生变化[2] 。正常状态下应甲基化的区域未甲基化,而症状状态下非甲基化区域出现甲基化,例如CpG岛相关启动子呈超甲基化。这可导致受累基因座的染色质结构发生变化,致使基因
发光基团pNA游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1.准备工作: A、 裂解液溶解后混匀,冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备:每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT,冰浴备用。 2.样本处理: A、悬浮细胞 1) 诱导完成后的细胞,2000 rpm离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS轻轻重悬细胞并计数
在上清中。 3. 取离心后的上清,转移至新管,立即使用或-70°C冻存。通常上清内植物色素已基本去除,如有少量残留亦不影响蛋白定量及电泳实验。建议用BCA方法进蛋白定量(我公司的BCA蛋白定量试剂盒#P1511)。 如进行双向电泳或欲彻底清除色素等杂质可进行以下内骤: 1. 取上清液加入4倍体积的丙酮或甲醇混匀,-20°C至少一小时以充分沉淀蛋白质。 2. 12000 g离心15分钟沉淀蛋白。 3. 弃去上清。自然干燥蛋白沉淀,依据试验将沉淀溶于相应的缓冲液。如进行Western






