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文献和实验的解离基团而形成各型离子交换剂,其中最常用的是DEAE纤维素和羧甲基纤维素。DEAE-纤维素(diethylaminoethyl-cellulose,DEAE)是在纤维素上引入二乙基氨基乙基,它是弱碱型阴离交换剂。吸附蛋白质的最适pH范围为7~9,pH超过9.5,DEAE基团则不解离带电荷。每克DEAE含0.96~1.24mmol/L可解离基团,与蛋白质的交换量可达75~122mg/100mgDEAE。交换吸附于离子交换剂上的物质,通常利用改变洗脱液pH或提高洗脱液中离子强度的方法洗脱下来,从而获得
相关专题 (一) 原理 DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)为弱碱性阴离子交换剂。用NaOH将CL-型转变为OH-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为PH6.85~7.5),其余均属酸性蛋白。在PH7.2~7.4的环境中,酸性蛋白均被DEAE-Sephadex A-50吸附,只有γ球蛋白不被吸附。因此,通过柱层析γ球蛋白便可在洗脱
相关专题 (一)原理 离子交换是指液相中的离子与固定相上可解离基团的可逆交换反应。利用这个反应先将要分离的混合物在一定pH的溶液中解离,而后流经固定相,使之与固定相上的可解离基团进行离子交换,吸附于固定相上,凡不能进行交换吸附的成分,则流出层析柱外。再根据交换吸附于固定相上的各组分解离度的差别,运用不同的pH值或不同盐浓度的溶液作流动相,流过层析柱将各组分分别再交换洗脱下来,这样混合物的各组分即被分开,达到分离的目的,此即为离子交换
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