- ￥1490
- 泽叶生物
- 中国/德国
- ZY13-83400
- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
‘-20℃保存
- 保质期：
有效期一年
- 库存：
30
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格：
50次
PCR使用注意事项
1. 试剂盒中的所有组份，在室温～37℃完全融化后，用移液枪吸打混匀或将Microtube上下颠倒混匀，尽量避免剧烈振荡。混合10×LA PCR Buffer, LA Taq时, 为防止起泡或酶失活，需注意仔细轻轻混合。融化后的各组份在使用前请置于冰中保存。
2. 配制反应液时，使用移液器轻轻吸打混合，不能剧烈振荡。
3. 扩增长片段DNA时的引物特异性要高。引物的推荐长度为25-30 mers。
4. 尽量使用高纯度的模板DNA。扩增长片段DNA时的模板使用量为通常PCR时的4～5倍。
步骤、过程：
构建一段寡核苷酸探针：5’端标记荧光染料报告基团，3’端标记淬灭染料基团。当探针保持完整时，淬灭基团的靠近会通过空间上的荧光共振能力转移（FRET）而显著降低由报告染料基团发射的荧光。
如果存在目标序列，探针便会在其中一个引物结合位点的下游发生退火，并随着引物的延伸通过Taq DNA聚合酶的5’核酸酶活性，完成切除。
探针的切除将会引起：
将报告染料基团和淬灭染料基团进行分离，增强了报告染料基团的信号。
将探针从目的链上去除，使引物继续沿模板链末端延伸。因此，探针的介入并不会抑制整个PCR过程。
内源性对照：
数字 PCR 不依赖内源性对照品进行参考测量。对于内源性对照进行扩增可用于对加入至反应的样品 RNA 或 DNA 的量进行标准化。对于基因表达定量，研究者采用过 ß-肌动蛋白、甘油醛-3-磷酸脱氢酶 (GAPDH)、核糖体 RNA (rRNA) 或其他 RNA 作为内源性对照。
标准品：
因为数字 PCR 通过阴性与总平行样的比例确定分子绝对计数，所有无需标准品。 由于样品量会除以校准品的量，所以标准曲线中的单位便被去除了。因此，对于标准品来说，只需知道其相对稀释比。对于相对定量，任何含有合适目标分子的 RNA 或 DNA 储存液都可用于制备标准品。
每经过一个循环，就会有更多的报告基因染料分子从各自的探针上切断，荧光强度会随着合成的扩增片段数量的增加而增加。
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文献和实验，某些菌株在初代分离时需要CO2，在生长过程中要有一定湿度，在干燥环境中不生长；在35～37 ℃均可生长，但在22 ℃或42 ℃均不生长。该菌在BAP上不溶血，经24h 培养后菌落很小，48h 后可达1mm，菌落为圆形、凸起、光滑、有光泽而边缘整齐，某些菌株的菌落可长入培养基中，使培养基表面琼脂凹陷。麦康凯琼脂上不生长。人心杆菌氧化酶阳性，触酶阴性，吲哚阳性，不还原硝酸盐。 啮蚀艾肯菌是革兰阴性多形性球杆菌(见图5)，有一种漂白剂的气味，兼性厌氧，是口腔和许多其他粘膜表面的正常菌群。啮蚀艾肯菌
corrodens 啮蚀艾肯菌 Enterobacter aerogenes 产气肠杆菌 Enterobacter amnigenus 河生肠杆菌 Enterobacter asburiae 阿氏肠杆菌 Enterobacter cancerogenus 生癌肠杆菌 Enterobacter cloacae 阴沟肠杆菌 Enterobacter gergoviae 日沟维肠杆菌 Enterobacter intermedius 中间肠杆菌 Enterobacter
Testing Meningococcal Vaccines for Mitogenicity and Superantigenicity
Proteins with intrinsic mitogenic properties are widely represented in prokaryotes, such as in different Streptococcus species (1 –3 ), Candida albicans (4 ), and Eikenella corrodens (5 ). Specifically, several bacterial porins
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