- ￥3990
- 康朗生物
- KL-15-35750
- 中国/上海
- 2025年07月10日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Adenovirus(AV)
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件：
负20度
- 规格：
50次
Adenovirus(AV)
产品及特点
1.即开即用，用户只需要提供样品DNA模板。
2.引物和探针经过优化，灵敏性高。
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4.特异性高，引物是根据非洲猪瘟病毒高度保守区设计，不会跟其他病毒的DNA发生交叉反应。
5.本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
本产品只能用于科研。
规格及成分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×Probe qPCR MagicMix | 0.5 mL（本色盖） |
| 试剂二 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） |
| 试剂三 | 腺病毒E型PCR引物 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 | 腺病毒E型qPCR探针 | 100 μL（棕色管） |
| 试剂五 | 腺病毒E型阳性对照2.0 (1×10E8拷贝/μL) |
50 μL（红盖） |
| 试剂六 | 核酸释释剂试用装 | 50次（2.5mL） |
| 使用手册 | 1 份 |
自备试剂：样品DNA。
使用方法 一、稀释标准曲线样品（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1.标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
2.用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同）。
3.在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4.换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5.换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6.重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
7.如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
8.用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的柱式病毒DNAout。本试剂盒免费赠送50次免DNA提取的核酸释放剂试用装，该释放剂的裂解液可以直接作为PCR模板，省略了DNA提取步骤。
三、Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
9.如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于标准曲线样品。
10.在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加）：
| 成份 | N+2 个 样品管 |
PCR 阴性 对照管 |
标准曲线 样品管（2-7管） |
| 2×Probe qPCR MagicMix | 10μL | 10μL | 各10μL |
| 腺病毒E型qPCR探针 | 2μL | 2μL | 各2μL |
| 腺病毒E型 PCR引物混合液 |
2μL | 2μL | 各2μL |
| 待测样品DNA模板 | 6μL | 不加 | 不加 |
| 第7步所得标准曲线样品稀释液（2-7号） | 不加 | 不加 | 各6μL（2号样到2号管，3号样到3号管…） |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 94℃ | 5 min |
| PCR 反应 （40 个循环） |
94℃ | 0.5 min |
| 55℃ | 0.5 min（采集FAM通道的荧光信号） | |
| 72℃ | 0.5 min | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
- 数据处理
12.如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的log值为横轴，以Ct值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的Ct值从标准曲线上推算出样品DNA浓度的log值，再推算出其浓度。
13.如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照Ct必须大于或等于40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct值应该小于或等于30。对待测样品，如果其Ct大于或等于40则为阴性，如果小于或等于35则为阳性。如果在35-40之间，则重复一次。重复实验的Ct值如果大于或等于40则为阴性，如果小于40，则为阳性。
荧光定量试剂对低丰度基因进行扩增定量时，较易出现无信号或者非特异性扩增，且Ct值常大于30。通过加大样本量或反应体系，亦无显著改观。其中一个重要的原因是目的基因浓度较低时，Taq酶不能有效结合到目的扩增区域，导致扩增失败。
荧光定量PCR试剂多年研发经验的基础上研发而成的定量试剂，该产品采用了抗体法热启动Taq酶。抗体与Taq酶紧密结合，在50℃反应30min条件下，仍然可以封闭95%以上的酶活，有效抑制了Taq酶结合到非目的扩增区域，限制了由于引物非特异性退火而导致的非特异性扩增。同时，配方添加了提升PCR反应扩增效率的因子，大大提升扩增效率，保证定量结果的可靠性，非常适合低浓度模板的扩增。
3.产品特点
★灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
★特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
★稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
★扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验型启动子（CMV、Ubi等）终止转录的情况。载体系统也分多种，包括慢病毒载体、腺病毒载体、质粒载体等。瞬时过表达方式主要是经过人工化学修饰的运用化学方法合成的双链RNA，能模拟细胞中内源性成熟miRNA的高水平表达，以增强内源性miRNA的调控作用，进行功能获得性研究。只需直接转染进入细胞，即可检测功能变化，快速，方便。miRNA靶位点鉴定：目前最为常用的miRNA靶位点鉴定方法是荧光素酶报告基因法。其基本原理是首先构建荧光素酶表达载体，将希望鉴定的miRNA靶基因的3′UTR构建到荧
，并且对氯仿等试剂具有抗性。 特异性强：rAAV 有十数种常用的血清型，不同的血清型对不同的脏器有较高的识别及感染能力。 rAAV 的局限性有哪些？ 体外实验表达水平较低：主要是因为 rAAV 病毒的基因组是单链 DNA，在体外环境形成双链并转录翻译外源基因的效率非常低。可以在体外水平感染 rAAV 病毒的同时感染辅助病毒比如 Ad 5 型腺病毒或者终浓度 10~50 mM 的丁酸钠等方法提高细胞实验的 rAAV 表达量。 需较长时间开始表达：同样是需要从单链 DNA 变成双链 DNA，rAAV
【公告】丁香通试用中心：10月免费试用装精选（10月18日有更新）
200ul低吸附盒装吸头 进口TS3000转染试剂 纳米微粒 非脂质体 其他推荐： 单组分TMB显色液 Peroxidase Conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (Min Hu, Ms) 二抗 96通道个人型半自动移液系统 小动物气体麻醉机，大小鼠气体吸入式麻醉机 四通道实时荧光定量PCR检测系统 Tanon-5200化学发光成像系统（包邮） 优质微晶纤维素MCC（进口） 罗恩1-10ml电动移液器 EpiScript逆转录酶 western
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
