- ￥1490
- 康朗生物
- 中国/德国
- KL13-1KL1710
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
‘-20℃保存
- 保质期：
有效期一年
- 库存：
30
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 规格：
50次
PCR使用方法：
2. 如果有 N 个样品，则需要进行 N+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。如果用本试剂盒自带的 DNA 释放剂试用装。则按下面步骤操作：
3. 配制溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液（足够 10 个样品）为例：在一干净塑料
管中加入 10uL 溶液 A 成分一，20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超纯水，充分混合均匀即可。溶液 A 工作液可室温放置，但最好在一周内用完，不要长期放置。一次检测一个样品需要 100uL 溶液 A 工作液，1mL 工作液足够 10 个样品。如果待测样品数量为其他数字，配制的溶液 A 工作液的体积需要做相应的调整。
4. 在标记好的 N+2 个离心管中，加入 1-5mg 固体样品（半粒芝麻大小，如奶酪）或5uL 液体样品（如牛奶）待测样品。在样品制备阳性对照中加入 5uL 阳性对照，在样品制备阴性对照中加入 5uL 水。
5. 在每个管中加入 100 uL 溶液 A 工作液，确保固体样品被溶液淹埋，如果是液体样品则震荡混匀。
6. 95℃保温 10 分钟。
7. 待冷却到常温后加入 10uL 溶液 B 并混匀得 DNA 释放液。每个样品得到的 DNA释放液足够进行 50-100 次 PCR。
二、设置 PCR 反应（40 uL 体系）
8. 在 N+2 个 PCR 管中加入下列成分，下面以样品数为 1 举例（注意：如果第一次使用DNA 释放剂，最好每个样品设置两个模板用量的 PCR 反应，两个反应的模板使用量差 10 倍，由此确定最佳用量，以后就用效果好的那个模板用量）：
| 成份 | 样品（用量1） | 样品（用量2） | 阳性对照 | 阴性对照 |
| 即用型 PCR Mix 3.0 | 20 uL | 20 uL | 20 uL | 20 uL |
| PCR 引物混合液 | 2 uL | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
| 制备的样品 | 18 uL | 2 uL | 无 | 无 |
| 样品制备阳性对照 | 不加 | 不加 | 2 uL | 不加 |
| 样品制备阴性对照 | 不加 | 不加 | 不加 | 2 uL |
| 超纯水 | 不加 | 16 uL | 16 uL | 16 uL |
9. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行 PCR。
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 94℃ | 10分钟 |
| PCR 反应 （35 个循环） |
94℃ | 45s |
| 56℃ | 45s | |
| 72℃ | 45s | |
| 延伸 | 72℃ | 5分 |
10. 电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长度为 121bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增
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文献和实验(Boba)。横痃不断溢脓，形成瘘或引流部位继发溃疡。溃疡发生在外阴部位。溃疡一般为1～7个。有时患宫颈或阴道内溃疡的女性可无症状。 2．诊断：杜克雷嗜血杆菌是一种革兰氏染色阴性短棒状菌，0.5～0.6m宽，1.6～2.0m长。溃疡分泌物涂片革兰氏染色显示成群或成簇的杜克雷嗜血杆菌，有时在皮损碎片之间为短的杆菌链，有时呈特征性的“铁轨”状。横痃处针吸革兰氏染色更特异，但很难查到菌。 3．治疗：首选药物：①红霉素500mg，每日4次，口服，疗程7天。②头孢三嗪250mg
到20多种。 性传播疾病具有多种多样的病原体，包括细菌、真菌、螺旋体、衣原体、支原体、病毒、寄生虫等各类病原微生物。常见的病原体有： ①细菌：淋病双球菌、杜克雷嗜血杆菌、阴道加特纳氏杆菌等。②真菌：念珠菌等。③螺旋体：梅毒螺旋体。④衣原体：眼生殖器衣原休、性病性淋巴肉芽肿衣原体。⑤支原体：解脲支原体、生殖道支原体、人型支原体。⑥病毒：人乳头瘤病毒（６、11、 16、18型）、单纯疱疹病毒Ⅱ型、人类免疫缺陷病毒、传染性软疣病毒、乙型肝炎病毒、巨细胞病毒等。⑦
杜克雷嗜血杆菌 多重PCR 生殖道溃疡病人的直接检测 嗜肺军团菌 PCR 与爆发相关菌株的分型 金氏杆菌属 PCR 临床标本鉴定 念珠菌属 PCR 通过“DNA”指纹鉴定 梅毒螺旋体 多重PCR 生殖道溃疡标本直接检测 伯氏螺旋体 巢式PCR 治疗前、中、后检测 问号状钩端螺旋体 PCR 钩端螺旋体血清型的鉴定 CDC group Ⅳ 群 PCR 分型 沙眼衣原体 PCR 无症状病人的诊断 三、分子生物学技术在细菌药敏试验中的应用 分子生物学技术在检测
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