- ￥4998
- HZbscience
- 中国/德国
- HZ15-HZ15700
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
‘-20℃保存
- 保质期：
有效期一年
- 库存：
30
- 供应商：
上海沪震实业有限公司
- 规格：
50次
PCR试剂盒具有下列特点：
1. 一管式操作，用户只需要提供样品即可。
2. 根据PCR基因保守区域设计引物，能专一性地检测出猪的成分，但不能检测其他非猪类动物成分（如鸡、牛、羊等）。
3. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
4. 只需要普通 PCR 仪和凝胶电泳仪，无需配置贵重仪器设备。
5. 对混合样品中猪成分的检测下限为 0.1%，对样品中猪成分的核酸检测下限为 1.0ng/µL。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 40uL 体系的常规 PCR。
设计PCR用引物时的注意事项?
可以从以下几个方面考虑。
1. 引物长度通常为20～25 mer。但进行LA PCR时，引物长度应增长为30～35 mer。
2. 二条引物之间不能进行Annealing，对3′端的3个碱基需特别注意。
3. GC含量在50～60%，避开局部富含GC或AT，为了使引物和模板稳定结合，3′端应避开AT rich结构。
4. 避开引物自身形成二级结构。
5. 选择Tm温度相互接近的二条引物。
PCR用引物的Tm值的计算方法?
引物为20 mer以下时：
Tm = 2℃×(A+T) + 4℃×(G+C)
引物为20 mer以上时：
Tm = 81.5 + 0.41×(GC%) - 600/L
其中L为引物的长度。
在PCR反应过程中选择Annealing温度时，一般为 (Tm - 5)℃。
PCR用引物中含有Inosine (次黄苷) 碱基，其Tm值怎样计算?
可以不考虑Inosine碱基，使用A、G、C、T计算Tm值就可以。
PCR用引物的使用量?
合适的终浓度可在0.1 μM～1.0 μM之间选择。引物的浓度太低时，有时扩增产物太少；引物浓度太高时，比较容易出现非特异性扩增反应。通常模板DNA的量较多或High complexity DNA (例如Human genome DNA) 作模板时，引物浓度应低一些；当模板DNA的量较少或Low complexity DNA (例如Plasmid等) 作模板时，引物浓度应高一些。
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文献和实验Methods for Growth and Purification of Enteric Adenovirus Type 40
The enteric adenoviruses of subgroup F (Ad40 and Ad41) pose some special problems of cultivation, as they cannot be readily passaged in many of the cell types used to propagate the more commonly used subgroup C serotypes (Ad2 and Ad
Integrated Cell Culture/PCR for Detection of Enteric Viruses in Environmental Samples
may be directly surveyed for pathogenic viruses, in a timely manner. Direct virus analysis will lead to better assessment of the presence and risk of human enteric viruses in the environment, so that control measures may be developed with true virus occurrence
延伸反应处于优势地位，扩增曲线正常；2. 降低延伸步骤反应温度，使其低于异源双链的熔解温度，比如延伸温度从 77℃ 降到 72℃，扩增曲线也是正常的。 图 3. 嵌入性染料法荧光定量消除「鱼钩效应」的方式 [1] 虽然能够引起「鱼钩效应」的异源双链错配程度无法估计，但单碱基水平错配还不足以引起 PCR 产物熔解温度发生明显改变。 探针法： 除了染料法，探针法荧光定量 PCR 实验也有可能产生「鱼钩效应」。采用杂交探针，扩增子链和探针之间会形成竞争，荧光信号明显下降，一般发生在模板浓度比较高、单链扩增
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