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- 2025年07月12日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
‘-20℃保存
- 保质期：
有效期一年
- 库存：
30
- 供应商：
上海沪震实业有限公司
- 规格：
50次
PCR试剂盒具有下列特点：
1. 一管式操作，用户只需要提供样品即可。
2. 根据PCR基因保守区域设计引物，能专一性地检测出猪的成分，但不能检测其他非猪类动物成分（如鸡、牛、羊等）。
3. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
4. 只需要普通 PCR 仪和凝胶电泳仪，无需配置贵重仪器设备。
5. 对混合样品中猪成分的检测下限为 0.1%，对样品中猪成分的核酸检测下限为 1.0ng/µL。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 40uL 体系的常规 PCR。
设计PCR用引物时的注意事项?
可以从以下几个方面考虑。
1. 引物长度通常为20～25 mer。但进行LA PCR时，引物长度应增长为30～35 mer。
2. 二条引物之间不能进行Annealing，对3′端的3个碱基需特别注意。
3. GC含量在50～60%，避开局部富含GC或AT，为了使引物和模板稳定结合，3′端应避开AT rich结构。
4. 避开引物自身形成二级结构。
5. 选择Tm温度相互接近的二条引物。
PCR用引物的Tm值的计算方法?
引物为20 mer以下时：
Tm = 2℃×(A+T) + 4℃×(G+C)
引物为20 mer以上时：
Tm = 81.5 + 0.41×(GC%) - 600/L
其中L为引物的长度。
在PCR反应过程中选择Annealing温度时，一般为 (Tm - 5)℃。
PCR用引物中含有Inosine (次黄苷) 碱基，其Tm值怎样计算?
可以不考虑Inosine碱基，使用A、G、C、T计算Tm值就可以。
PCR用引物的使用量?
合适的终浓度可在0.1 μM～1.0 μM之间选择。引物的浓度太低时，有时扩增产物太少；引物浓度太高时，比较容易出现非特异性扩增反应。通常模板DNA的量较多或High complexity DNA (例如Human genome DNA) 作模板时，引物浓度应低一些；当模板DNA的量较少或Low complexity DNA (例如Plasmid等) 作模板时，引物浓度应高一些。
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文献和实验，不靠壁，不贴液面。 混匀平均分装的注意事项： 1、第一管吸液前需要先把枪头在液面中浸润一下，以保证三复孔的枪头吸液量是差不多的。 2、用混匀器进行混匀，不要用移液器吹打。 详细说明书 transhold cat. A2010A0112荧光定量PCR Premix试剂盒(荧光染料) （FQ
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
新品上市 | 样本前处理减负，翌圣全新 qPCR 预混液实现样本直接扩增！
样本前处理耗时长，限制检测效率的提升 传统qPCR检测需要经过样本采集、核酸提取纯化、体系配制、扩增检测等多个步骤，仅核酸提取环节就可能耗时30分钟到1小时以上。对于大批量样本检测或应急检测场景，漫长的前处理流程直接拉长了整体检测周期。 病原菌残留风险，影响检测结果的可信度 分子诊断试剂盒的开发过程中，如果酶或其他组分携带病原菌残留，微量的污染DNA可能会产生非特异性扩增，使得扩增效率降低，影响阳性判断值的确定，降低检测试剂开发的灵敏度，给开发
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