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血液线粒体提取试剂盒

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  • 百奥莱博
  • XH004-ABK
  • 北京
  • 2025年07月14日
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    • 英文名

      Blood Mitochondrion Extraction Kit

    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      4℃可保存3个月,长期保存可置-20℃

    • 规格

      50T|100T

    特别提示:包括血液线粒体提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:血液线粒体提取试剂盒
    英文名称:Blood Mitochondrion Extraction Kit
    产品货号:XH004
    产品规格:50T|100T

    本试剂盒可用于从血液中分离完整而纯化的线粒体。其制备物,可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。但不适用于进一步DNA提取。

    试剂盒组成:
    组份 50T 100T
    红细胞裂解液(10X) 100mL 100mL×2
    白细胞裂解液 50mL 100mL
    线粒体清洗液 25mL 50mL
    线粒体保存液 5mL 10mL

    保存条件:4℃可保存3个月,长期保存可置-20℃。

    操作步骤:
    1.血液处理:
      血液要求:非肝素钠抗凝血,zuì好使用新鲜血液。对于陈旧血液,由于冻凝过程中冰晶已经对细胞核膜和线粒体膜产生损伤,所以线粒体得率会大大减少,并且完整性也会降低。
    a.对于无核红细胞全血(如哺乳动物处周血),取血约5ml(适当分成几管),加入3倍体积的红细胞裂解液(稀释后的工作液,下同),混匀,800×g 5min离心收集白细胞。加入1-2ml红细胞裂解液(稀释后的工作液),吹打重悬白细胞,合并于一管中,800×g 5~10min离心收集白细胞。此时如果白细胞有可见红色,可再次用少量(0.5ml)红细胞裂解液洗细一次。
    b.对于有核红细胞全血(如禽类全血),取约200-300μl全血,800×g 5~10min离心收集全细胞,用生理盐水或者PBS清洗两次,留沉淀去上清。清洗时请用去尖吸头吹打。
    2.在收集到的细胞中,加入1.0mL冰预冷的白细胞裂解液重悬细胞,将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内,0℃冰浴研磨20~40次;
    3.匀浆物转移到离心管,4℃,1000×g离心5min;
    4.取上清,加入一新的离心管中,4℃,1000×g再次离心5min(一共两次离心,完整去核)。
    5.取上清,加入一新的离心管中,4℃,12,000×g离心10min。离心后的上清含胞浆成分,可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管,线粒体沉淀在管底;
    6.在线粒体沉淀中加入0.5 mL线粒体清洗液重悬线粒体沉淀,4℃,1000×g离心5min(再次去核);
    7.取上清,加入一新的离心管中,4℃,12,000×g离心10min。弃上清,高纯度的线粒体沉淀在管底;
    8.用50 -100μL线粒体保存液或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀,立即使用或-70℃保存。

    注意事项:
    为保证获得完整及尽可能多的线粒体,匀浆条件要示:第一是全程低温操作。第二是快速。第三,如有条件可将匀浆后的碎片在显微镜下观察。

    一般低温度心机都有离心力显示,如果没有,可以用以下公式简单的换算。
      G=1.11×(10-5)×R×[rpm]2
    G为离心力,一般以g(重力加速度)的倍数来表示;[rpm]2即:转速的平方;R为半径,单位为厘米。

    我公司销售的血液线粒体提取试剂盒质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。

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