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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
85
- 英文名:
Blood Mitochondrion Extraction Kit
- 保质期:
3个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃可保存3个月,长期保存可置-20℃
- 规格:
50T|100T
特别提示:包括血液线粒体提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:血液线粒体提取试剂盒
英文名称:Blood Mitochondrion Extraction Kit
产品货号:XH004
产品规格:50T|100T
本试剂盒可用于从血液中分离完整而纯化的线粒体。其制备物,可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。但不适用于进一步DNA提取。
试剂盒组成:
| 组份 | 50T | 100T |
| 红细胞裂解液(10X) | 100mL | 100mL×2 |
| 白细胞裂解液 | 50mL | 100mL |
| 线粒体清洗液 | 25mL | 50mL |
| 线粒体保存液 | 5mL | 10mL |
保存条件:4℃可保存3个月,长期保存可置-20℃。
操作步骤:
1.血液处理:
血液要求:非肝素钠抗凝血,zuì好使用新鲜血液。对于陈旧血液,由于冻凝过程中冰晶已经对细胞核膜和线粒体膜产生损伤,所以线粒体得率会大大减少,并且完整性也会降低。
a.对于无核红细胞全血(如哺乳动物处周血),取血约5ml(适当分成几管),加入3倍体积的红细胞裂解液(稀释后的工作液,下同),混匀,800×g 5min离心收集白细胞。加入1-2ml红细胞裂解液(稀释后的工作液),吹打重悬白细胞,合并于一管中,800×g 5~10min离心收集白细胞。此时如果白细胞有可见红色,可再次用少量(0.5ml)红细胞裂解液洗细一次。
b.对于有核红细胞全血(如禽类全血),取约200-300μl全血,800×g 5~10min离心收集全细胞,用生理盐水或者PBS清洗两次,留沉淀去上清。清洗时请用去尖吸头吹打。
2.在收集到的细胞中,加入1.0mL冰预冷的白细胞裂解液重悬细胞,将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内,0℃冰浴研磨20~40次;
3.匀浆物转移到离心管,4℃,1000×g离心5min;
4.取上清,加入一新的离心管中,4℃,1000×g再次离心5min(一共两次离心,完整去核)。
5.取上清,加入一新的离心管中,4℃,12,000×g离心10min。离心后的上清含胞浆成分,可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管,线粒体沉淀在管底;
6.在线粒体沉淀中加入0.5 mL线粒体清洗液重悬线粒体沉淀,4℃,1000×g离心5min(再次去核);
7.取上清,加入一新的离心管中,4℃,12,000×g离心10min。弃上清,高纯度的线粒体沉淀在管底;
8.用50 -100μL线粒体保存液或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀,立即使用或-70℃保存。
注意事项:
为保证获得完整及尽可能多的线粒体,匀浆条件要示:第一是全程低温操作。第二是快速。第三,如有条件可将匀浆后的碎片在显微镜下观察。
一般低温度心机都有离心力显示,如果没有,可以用以下公式简单的换算。
G=1.11×(10-5)×R×[rpm]2
G为离心力,一般以g(重力加速度)的倍数来表示;[rpm]2即:转速的平方;R为半径,单位为厘米。
我公司销售的血液线粒体提取试剂盒质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 新鲜血液样品( 200 μl )2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
微量样品基因组 DNA 提取试剂盒操作指南(DP316)——少量血液
实验准备:1. 100 μl以内抗凝全血(本实验以血清为例)2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液 PW 和 GD 中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。Carrier RNA储存液的配制:第一次使用 Carrier RNA 时,请将 Carrier RNA(310 µg)溶解在310 µl RNase-Free ddH2O中,将溶液分装储存
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
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