CollagenaseIII 胶原酶III

胶原酶，核心bioreagents，粗制胶原酶一般使用，酶类指数，酶，蛋白酶，蛋白酶和蛋白质测序、蛋白水解酶、蛋白酶的酶和底物，研究要点，生化试剂，酶、抑制剂底物。胶原酶是由四克每摩尔酶的钙激活。它是由乙二醇双（β-氨基乙基醚抑制）-N，N，N′，N′-乙酸、β-巯基乙醇。该产品是一种由C.胶原酶溶组织分泌的酶的混合物，不同产品的成分的相对比例分化10-18中分泌的酶。主要成分是两胶原酶，梭菌，和中性蛋白酶。这些酶的协同作用降解胶原及胶原酶酶和中性蛋白酶是细胞从组织有效释放必要的其他细胞内的材料的作用。各种类型的胶原蛋白是胶原酶的天然底物。

胶原酶的分类：

胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝细胞专用胶原酶，要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。

1、胶原酶Ⅰ用于上皮、肺和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细 胞，用于哺乳动细胞的分离。

2、胶原酶Ⅱ适用于肝脏，骨，甲状腺，心脏和唾液腺组织。

3、胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分，分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。

4、胶原酶Ⅴ包含至少7种蛋白酶成分，分子量从68-130KD不等。它可用于胰腺小岛组织的分离，将结缔组织分离成单个细胞。

胶原酶的使用：

1、将漂洗、修剪干净的组织剪成1~2mm3左右小块。

2、将组织块放入离心管(三角烧瓶)中加入30~50倍体积的胶原酶溶液，旋紧盖子(密封烧瓶)。

3、将烧瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱内，每隔3min振摇一次，如能放在37℃的恒温震荡水浴箱中则更好。消化时间与组织的类别很有关系，对于某些肿瘤组织或其他较致密结缔组织，消化时间4~48h， 对于容易消化的组织可以采用37℃震荡消化15~45min，也可以根据具体情况而定。如组织块已分散而失去块的形状，一经摇动即成细胞团或单个细胞，可 以认为已消化充分。上皮组织经胶原酶消化后，由于上皮细胞对此酶有耐受性，可能仍有一些细胞团未完全分散，但成团的上皮细胞比分散的单个上皮细胞更易生 长，因此，如无特殊需要可以不必再进一步处理。

4、收集消化液(有时含个别组织块及没有充分消化的组织碎屑则需用100目不锈钢网过滤)，离心1000r/min，5min，去除上清，用Hanks液或者无血清培养液离心漂洗1~2次，去除上清，加培养液制成细胞悬液，接种培养瓶。

胶原酶的应用：

采用胶原酶法对晚期糖基化终产物进行了制备研究。酶也被用来与其他蛋白酶分解为人类肿瘤，小鼠肾、脑、肺上皮细胞和许多其他组织。也正是在肝脏和肾脏灌注研究有效消化胰腺，而非实质肝细胞分离。这种酶进行肝细胞释放的适宜性，在约1毫克/毫升的浓度，在每个大鼠肝脏总体积100毫升。

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相关文献：
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