胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B

模拟过氧化物酶的制备、固定与应用

一．实验目的 学习一种人工合成模拟过氧化物酶的方法，了解柱子型固定酶的原理以及感性认识酶分析法的一些应用。 二．实验原理 过氧化物酶的辅基是血红素。在体外将血红素与牛血清白蛋白结合制备成含血红素的蛋白质分子作为模拟过氧化物酶。在确定血红素与牛血清白蛋白结合后，检测其的过氧化物酶活性。然后将此人工模拟酶固定在载体琼脂糖凝胶（Sepharose 4B）上并装柱，应用于检测样品中痕量过氧化氢的含量，因为过氧化氢的测定

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

凝胶电泳是许多分子生物学实验的重要部分。建立核酸电泳需采取一系列步骤来实现核酸样品的最佳分离和分析。 核酸凝胶电泳工作流程 1、选择和制备凝胶 琼脂糖和聚丙烯酰胺是核酸分离中最常用的两种凝胶基质。两种材料都是三维基质，孔径大小适合核酸分离，且与样品间无反应。可通过改变基质的百分比来调整孔径大小，从而有效分离不同大小的核酸。 有关琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺之间的选择，主要取决于核酸样品的大小和所希望达到的分辨率，虽然凝胶灌制和样品回收的方法也可考虑（表 1）。琼脂糖凝胶的孔径大小非常理想，可分

亲和层析法纯化胰蛋白酶粗液的方法步骤

基上，使得亲和层析技术向前推进了一大步。直到目前，溴化氰活化载体还是用得最多，效果最好的活化方法。1971年Porath 又报道了应用环氧氯丙烷在碱性条件下活化载体的方法，克服溴化氰由于剧毒给操作带来的不便，使活化载体的方法简便易行，亲和层析技术得到广泛的应用。 目前可用于活化载体的活化剂有几十种之多，但常用的是溴化氰、环氧氯丙烷、1.4—丁二醚、戌二醛等。采用环氧氯丙烷为活化剂，sepharose 4B 为载体，鸡卵类粘蛋白为配基可合成适用于分离胰蛋白酶的亲和吸附 剂。载体活化