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植物氨态氮含量检测试剂盒 微量法

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  • ¥1750
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC1525
  • 2025年07月16日
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    • 保存条件

      2-8℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Plant Ammonium Nitrogen Content Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC1525-100T/96S

    • 规格

      100管/96样

    植物氨态氮含量
    检测试剂盒说明书

    微量法
    货号:BC1525
    规格:100T/96S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    提取液 液体120 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂一 粉剂×1 2-8℃保存
    试剂二 粉剂×2 2-8℃保存
    试剂三 液体22 mL×1瓶 2-8℃保存
    标准品 粉剂×1 2-8℃保存
    溶液的配制:
    1. 试剂一:临用前将试剂三倒入使其充分溶解备用。该试剂溶解后10天内有效。
    2. 试剂二:临用前加1 mL蒸馏水充分溶解。
    3. 标准品:10 mg半胱氨酸,临用前加入1.157 mL提取液,得到1000 μg/mL氮标准液。
    产品说明:
    氮素是构成生物体的一种必需元素。态氮进入植物细胞后形成氨基酸或酰胺,植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。
    氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应,产生蓝紫色化合物,在570nm有特征吸收峰;通过测定570nm吸光度,来计算氨基酸含量。
    技术指标:
    最低检出限:24.2 μg/mL
    线性范围:25-400 μg/mL
    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器用品:
    可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、无水乙醇、冰和蒸馏水。
    操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
    一、样本处理可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献
    按照质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,室温匀浆后于25℃12000g离心10min,取上清待测。
    二、测定步骤
    1. 分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至570nm,分光光度计蒸馏水调零。
    2. 将1000μg/mL氮标准液用提取液分别稀释为400300200、1005025 μg/mL
    3. 操作表:
    试剂名称(μL 测定管 标准管 空白管
    样本 15 - -
    标准品 - 15 -
    提取液 - - 15
    试剂一 150 150 150
    无水乙醇 150 150 150
    试剂二 15 15 15
    充分混匀后盖紧瓶盖封口膜封口(防止水分散失),置于沸水浴中保温10min,冷却后反复颠倒EP管数次,将测定管8000rpm离心5min后取上清,吸取200μL于微量玻璃比色皿或者96孔板中,于570nm测定吸光值。显色后务必在30min内测完。计算ΔA=A测定管-A空白管,ΔA标准=A标准管-A空白管。
    三、植物氨态氮含量计算
    1. 标准曲线的绘制:
    以各个氮标准液为横坐标,其对应的ΔA标准为纵坐标,建立标准曲线,得到标准方程y=kx+b,将ΔA带入方程中,得到x (μg/mL)
    1. NH3-N含量的计算:
    (1)按样本质量计算:NH3-N含量(μg/g 质量)=x×V提取÷W=x÷W
    (2)按蛋白浓度计算:NH3-N含量(μg/mg prot=x×V提取÷Cpr×V提取)=x÷Cpr
    W:样本质量,gCpr:蛋白浓度,mg/mLV提取:样本提取液总体积,1mL
    注意事项:
    为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
    相关发表文献:
    [1] Fuyuan Zhu,Moxian Chen,Wailung Chan,et al. SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses. Journal of Proteomics. September 2018; (IF3.537)
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    图标文献和实验
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    IF4.0000PMID
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