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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Plant Ammonium Nitrogen Content Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC1525-100T/96S
- 规格:
100管/96样
检测试剂盒说明书
微量法
货号:BC1525
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体120 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体22 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 粉剂×1支 | 2-8℃保存 |
- 试剂一:临用前将试剂三倒入使其充分溶解备用。该试剂溶解后10天内有效。
- 试剂二:临用前加1 mL蒸馏水充分溶解。
- 标准品:10 mg半胱氨酸,临用前加入1.157 mL提取液,得到1000 μg/mL氮标准液。
氮素是构成生物体的一种必需元素。氨态氮进入植物细胞后形成氨基酸或酰胺,植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。
氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应,产生蓝紫色化合物,在570nm有特征吸收峰;通过测定570nm吸光度,来计算氨基酸含量。
技术指标:
最低检出限:24.2 μg/mL
线性范围:25-400 μg/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、无水乙醇、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,室温匀浆后于25℃,12000g离心10min,取上清待测。
二、测定步骤
- 分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至570nm,分光光度计蒸馏水调零。
- 将1000μg/mL氮标准液用提取液分别稀释为400、300、200、100、50、25 μg/mL。
- 操作表:
| 试剂名称(μL) | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
| 样本 | 15 | - | - |
| 标准品 | - | 15 | - |
| 提取液 | - | - | 15 |
| 试剂一 | 150 | 150 | 150 |
| 无水乙醇 | 150 | 150 | 150 |
| 试剂二 | 15 | 15 | 15 |
三、植物氨态氮含量计算
- 标准曲线的绘制:
- NH3-N含量的计算:
(2)按蛋白浓度计算:NH3-N含量(μg/mg prot)=x×V提取÷(Cpr×V提取)=x÷Cpr
W:样本质量,g;Cpr:蛋白浓度,mg/mL;V提取:样本提取液总体积,1mL。
注意事项:
为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
相关发表文献:
[1] Fuyuan Zhu,Moxian Chen,Wailung Chan,et al. SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses. Journal of Proteomics. September 2018; (IF3.537)
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文献和实验Reducing the phytotoxicity of spent mushroom substrate (SMS) for sustainable growing media by superheated steam torrefaction: effects of temperature and residence time点击查看
| AuthorChen Jing, Zhang Dongdong, Yang Rui, Lin Wei, Wang Hong, Kang Ying, Qi Zhiyong, Zhou Wanlai | Publish_toBiomass Conversion and Biorefinery |
| IF4.0000 | PMID |
一 、目的:糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。不同载培条件,不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定,可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。二、原理糖类遇浓硫酸脱水生成糖醛或其衍生物,反应如下:糠醛或羟甲基糠醛进一步与蒽酮试剂缩合产生蓝绿色物质,其在可见光区620nm波长处有最大吸收,且其光吸收值在一定范围内与糖的含量成正比关系。此法可用于单糖、寡糖和多糖的含量测定,并具有灵敏度高,简便快捷,适用于微量样品的测定等优点
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