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- Solarbio
- 北京
- BC2190
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Phosphoenolpyruvate Carboxylase(PEPC) Activity Assay Kit
- 库存：
现货
- 供应商：
Solarbio
- CAS号：
BC2190-50T/48S
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50管/48样
磷酸烯醇式酸羧化酶（PEPC）活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号：BC2190
规格：50T/48S
产品说明：
磷酸烯醇式*酸羧化酶（EC 4.1.1.31）广泛存在于植物和微生物中，在动物及丝状霉菌中缺乏此酶。是催化 磷酸烯醇式*酸与二氧化碳反应生成草酰乙酸呈不可逆反应的酶，同时也是 C4 植物和 CAM 植物固定 CO2 的 关键酶，对三羧酸循环的运转起重要调节作用。 PEPC 催化磷酸烯醇式*酸和 CO2 生成草酰乙酸和 HPO4 2-，苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和 NADH 生 成苹果酸和 NAD+，在 340nm 测定 NADH 减少速率，计算 PEPC 活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL 石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰 和蒸馏水。
注意事项：
- 为保证实验结果的准确性，需先取 1-2 个样做预实验，ΔA 大于 0.6 时，建议将粗酶液用提取液稀释后再进行测定，当 ΔA 小于 0.01 时，可以延长反应时间（10min 或 15min）来测定。
- 空白管为检测各试剂组分质量的检测孔，正常情况下，变化不超过 0.02。
[1] Zhang Y H, Wang Z M, Huang Q, et al. Phosphoenolpyruvate carboxylase activity in ear organs is related to protein concentration in grains of winter wheat[J]. Journal of cereal science, 2008, 47(2): 386-391.
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文献和实验| AuthorMuhammad Moaaz Ali, Shaista Gull, Xiaobo Hu, Youming Hou, Faxing Chen | Publish_toPLANT PHYSIOLOGY AND BIOCHEMISTRY |
| IF6.5000 | PMID37329690 |
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 phosphoenolpyruvate carboxylase
为催化磷酸烯醇式丙酮酸与CO2 反应生成草酰乙酸呈不可逆反应的酶。 EC4． 1． 1． 31．在植物和细菌中广泛存在，在动物及丝状霉菌中缺乏此酶。在植物的叶绿体和细菌的可溶性分级沉淀中存在。大肠杆菌中的酶分子量约 36万的四聚体，可受很多因素的影响，例如可为乙酰辅酶 A活化，可受天门冬氨酸抑制。此酶是变构酶，主要功能为供给三羧酸循环以草酰乙酸，另外也与 C4 植物光合 CO2 固定反应（ C4 二羧酸循环）及景天科植物的苹果酸形成（景天酸代谢）等有关。
度。 （2） 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时，应注意仪器的校正和检定。 （3） 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种，使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时，影响精度的因素较多，故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品，如维生素A测定法，则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次，得到吸光度的相对标准偏差。表1 精密度测定结果 2.3 稳定性 取1mg/ml牛 血清 蛋白标准溶液每十分钟测定一次，50分钟内的吸光度变化如下表2。表2 稳定度测定结果 3. 结论该方法测定快速、简便，干扰物少，是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定的紫外分光光度法。
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