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- Solarbio
- 北京
- BC4080
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Cinnamic acid 4-hydroxylase(C4H) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC4080-50T/48S
- 规格：
50管/48样
紫外分光光度法
货号：BC4080
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体60mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
- 试剂二：临用前取一瓶粉剂加入3 mL乙醇溶解备用。2-8℃保存4周。
- 试剂三：临用前取一瓶粉剂加入3 mL双蒸水充分溶解待用。现配现用。-20℃分装可保存4周，避免反复冻融。
C4H又称反式肉桂酸-4-单氧化酶，是催化桂皮酸形成咖啡豆、香豆酸的酶。C4H多存在于高等植物、酵母、菌类中，属于细胞木质素合成途径中间的关键酶。
C4H催化肉桂酸和NADPH生成4-香豆酸盐和NADP，在340nm下测定NADPH的减少速率，即可反映C4H活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、乙醇、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、组织：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。12000g， 4℃离心15分钟，取上清，置冰上待测。
2、细胞或细菌样本的制备：先收集细胞或细菌样本到离心管内，弃上清，按照每500万细胞或细菌加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率200w，超声3s，间隔10s，重复30次）。12000g，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤
- 紫外分光光度计预热30min，波长调至340nm，蒸馏水调零。
- 加样表（在1mL石英比色皿中分别加入）
| 试剂名称（μL） | 测定管 |
| 试剂一 | 700 |
| 试剂二 | 100 |
| 试剂三 | 100 |
| 样本 | 100 |
注意事项：
当ΔA大于0.4时，建议将样本用提取液稀释后测量；ΔA过小时，建议增加酶促反应时间（5min或10min）或增加加入的样本体积来测定。
实验实例：
- 取0.1g黄豆（发芽）加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，测得计算ΔA=A1-A2=1.643-1.510=0.133，按样本质量计算酶活得：C4H酶活（U/g质量）=535.91×ΔA÷W=535.91×0.133÷0.1=712.76 U/g 质量。
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文献和实验| AuthorCongcong Wang, Yinhua Chen, Songbi Chen, Yi Min, Yanqiong Tang, Xiang Ma, Hong Li, Juanjuan Li, Zhu Liu | Publish_toCARBOHYDRATE POLYMERS |
| IF11.2000 | PMID37479443 |
一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；在细胞发生凋亡阶段，Caspase被激活，活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后，黄色
一、反应曲线 首先，我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图，可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，如下图所示： 二、反应原理 对于延迟区来讲，无规律可寻，对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法，是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点，并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等，此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
苯丙氨酸羟化酶 phenylalanine hydroxylase
也称苯丙氨酸 -4-单加氧酶，是一种由苯丙氨酸形成的酪氨酸加氧酶。 EC1． 14． 16． 1需要蝶啶作为辅酶，广泛存在于生物中，在动物是存在于肝脏内。在反应过程中，必须与第二二氢蝶啶的还原反应相偶联地进行。反应是特异的，但色氨酸在某种程度上也有 苯丙氨酸 O2 四氢蝶啶 酩氨酸 二氢蝶啶 H2 O 二氢蝶啶 NADPH＋ H 四氢蝶啶 NADP 作用，四氢蝶啶在某种程度上可用蝶啶代替。苯丙酮酸尿症是由于缺乏此酶引起
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