- ￥1800
- Solarbio
- 北京
- BC4085
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Cinnamic acid 4-hydroxylase(C4H) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC4080-50T/48S
- 规格：
100管/96样
肉桂酸-4-羟化酶（C4H）活性检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC4085
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体100 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
- 试剂二：临用前取一瓶粉剂加入2 mL乙醇溶解备用。2-8℃保存4周。
- 试剂三：临用前取一瓶粉剂加入2 mL双蒸水充分溶解待用。现配现用。-20℃分装可保存4周，避免反复冻融。
C4H又称反式肉桂酸-4-单氧化酶，是催化桂皮酸形成咖啡豆、香豆酸的酶。C4H多存在于高等植物、酵母、菌类中，属于细胞木质素合成途径中间的关键酶。
C4H催化肉桂酸和NADPH生成4-香豆酸盐和NADP，在340nm下测定NADPH的减少速率，即可反映C4H活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器、乙醇、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、组织：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心15分钟，取上清，置冰上待测。
2、细胞或细菌样本的制备：先收集细胞或细菌样本到离心管内，弃上清，按照每500万细胞或细菌加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率200W，超声3s，间隔10s，重复30次）。12000g，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤
- 紫外分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至340nm，紫外分光光度计蒸馏水调零。
- 加样表（微量石英比色皿/96孔UV板中分别加入）
| 试剂名称（μL） | 测定管 |
| 试剂一 | 140 |
| 试剂二 | 20 |
| 试剂三 | 20 |
| 样本 | 20 |
注意事项：
当ΔA大于0.4时，建议将样本用提取液稀释后测量；ΔA过小时，建议增加酶促反应时间（5min或10min）或增加加入的样本体积来测定。
实验实例：
- 取0.1g黄豆（发芽）加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，使用微量石英比色皿测得计算ΔA=A1-A2=1.1227-0.9854=0.1373，按样本质量计算酶活得：C4H酶活（U/g质量）=535.91×ΔA÷W=535.91×0.1373÷0.1=735.80 U/g 质量。
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文献和实验| AuthorCongcong Wang, Yinhua Chen, Songbi Chen, Yi Min, Yanqiong Tang, Xiang Ma, Hong Li, Juanjuan Li, Zhu Liu | Publish_toCARBOHYDRATE POLYMERS |
| IF11.2000 | PMID37479443 |
活性低。 图4-23 C4途径的三种类型 1.羧化阶段 由PEPC催化叶肉细胞中的磷酸烯醇式丙酮酸(phosphoenol plyruvate,PEP)与HCO3-羧化，形成OAA。 空气中的CO2进入叶肉细胞后先由碳酸酐酶 (carbonic anhydrase,CA)转化为HCO-3， CO2 +H2O → HCO-3 + H+。HCO-3被PEP固定在OAA的C4羧基上，PEPC的反应机理如下：(1)PEPC先与Mg2+结合；(2)再与底物PEP结合，形成一个三元复合
、AGPATl、CLICl和CSNK2B)、生物合成、电子转移、显示水介活性以及介导蛋白―蛋白间的相互作用中。以下是Ⅲ类基因区中的主要基因。 (1)补体基因：补体基因C2与月／基因相距极近，中间仅隔421bp，且二者有相似的内含子―外显子结构，可能是由同一组基因因重复而产生。C2与月／均具有多态性。用等电聚焦法至少可检出9个型别的C 2分子，其中最常见的为C2C。Bf在电泳中也具有明显的异质性，已发现的型别达20种以上。C2与月／表型及其基因频率在人种与地区间的差异十分显著。C4
方面还受环境影响。C4植物的叶片光合速率通常要大于C3植物，这与C4植物叶片具有花环结构等特性有关。许多植物的叶组织中有两种叶肉细胞，靠腹面的为栅栏组织细胞；靠背面的为海绵组织细胞。栅栏组织细胞细长，排列紧密，叶绿体密度大，叶绿素含量高，致使叶的腹面呈深绿色，且其中Chla/b比值高，光合活性也高，而海绵组织中情况则相反。生长在光照条件下的阳生植物(sun plant)叶栅栏组织要比阴生植物(shade plant)叶发达，叶绿体的光合特性好，因而阳生叶有较高的光合速率。同一叶片，不同部位上测得的光合
